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上海勁馬實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司
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兔子腫瘤壞死因子αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中兔腫瘤壞死因子α（TNF-α）水平。用純化的兔腫瘤壞死因子α（TNF-α）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入腫瘤壞死因子α，再與HRP標(biāo)記的羊抗兔抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔腫瘤壞死因子α呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)
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牛血清白蛋白實(shí)驗(yàn)原理使用目的：本試劑盒用于測(cè)定牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中牛血清白蛋白殘留檢測(cè)含量。實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中牛的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入牛的牛血清白蛋白抗原，再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的牛的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下
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嬰兒重癥肺炎是兒科常見的危重急癥，它可導(dǎo)致心力衰竭、呼吸衰竭等多臟器功能衰竭。在抗感染、強(qiáng)心、利尿等常規(guī)療效下結(jié)果仍不盡人意。危重患兒在嚴(yán)重感染、缺氧、心衰等情況下，內(nèi)源性阿片樣物質(zhì)異常增多，氧自由基產(chǎn)生增多。納絡(luò)酮為阿片受體競(jìng)爭(zhēng)性藥物，與分布在腦干等部位的阿片受體結(jié)合后，能有效地阻斷內(nèi)源性阿片樣物質(zhì)（OLS）所介導(dǎo)的各種效應(yīng)。目前認(rèn)為OLS包括內(nèi)啡肽和腦啡肽等，起著鎮(zhèn)靜、抑制呼吸、降低血糖、減慢心率、促進(jìn)缺血性腦水腫形成和發(fā)展等作用[1]。Onaldson等研究表明，納絡(luò)酮能增加休克動(dòng)物的心輸
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蛋白激酶與磷酸酶在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的作用
蛋白激酶與磷酸酶這兩個(gè)詞有些叫人難辨清楚。其實(shí)蛋白磷酸酶與蛋白激酶相輔相成，兩者共同構(gòu)成了細(xì)胞內(nèi)磷酸化與去磷酸化的蛋白活性開關(guān)系統(tǒng)，而且對(duì)于細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的作用也是相輔相成。蛋白激酶可使蛋白質(zhì)磷酸化，蛋白磷酸酶使蛋白去磷酸化。蛋白磷酸化與去磷酸化是真核細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的共同通路，其動(dòng)態(tài)變化幾乎涉及從胚胎發(fā)育到個(gè)體成熟的所有過程，包括細(xì)胞的癌變和凋亡。磷酸化與去磷酸化的平衡主要由蛋白激酶（proteinkinases,PK）和磷酸酶（proteinphosphatases,PPs）調(diào)控。磷酸化和去磷酸化 -
酸性磷酸酶的顯示方法1.目的與原理實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆誄omori法的基本原理和方法。觀察酸性磷酸酶在細(xì)胞內(nèi)的分布狀況。實(shí)驗(yàn)原理：酸性磷酸酶能分解磷酸脂而釋放出磷酸基。在pH5．0的環(huán)境中，磷酸基能與鉛鹽反應(yīng)形成磷酸鉛。但因其是無(wú)色的，所以再經(jīng)過與硫化銨作用，形成棕黑色的硫化鉛沉淀，由此就能顯示酸性磷酸酶在細(xì)胞內(nèi)的存在與分布。本實(shí)驗(yàn)的技術(shù)特點(diǎn)是：（1）采用冷凍涂片和中性福爾馬林固定，可避免在固定、包埋及制片過程中酶的失活，保證了實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性。（2）采用較短的作用時(shí)間，可避免細(xì)胞質(zhì)內(nèi)其它蛋白質(zhì)及核內(nèi)出現(xiàn)
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細(xì)胞膜的通透性觀察實(shí)驗(yàn)原理和操作步驟
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解細(xì)胞膜對(duì)物質(zhì)通透性的一般規(guī)律。2.了解溶血現(xiàn)象及其發(fā)生機(jī)制。二、實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞膜是細(xì)胞與環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的選擇通透性屏障。它是一種半透膜，可選擇性控制物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞。各種物質(zhì)出入細(xì)胞的方式是不同的，水是生物界zui普遍的溶劑，水分子可以按照物質(zhì)濃度梯度從滲透壓低的一側(cè)通過細(xì)胞膜向滲透壓高的一側(cè)擴(kuò)散，這種現(xiàn)象就是滲透。滲透作用是細(xì)胞膜的主要功能之一。將紅細(xì)胞放在低滲鹽溶液中，水分子大量滲到細(xì)胞內(nèi)，可使細(xì)胞脹破，血紅蛋白釋放到介質(zhì)中，由不透明的紅細(xì)胞懸液變?yōu)榧t色透明的血紅蛋白溶液，這 -
WesternBlot（免疫印跡法）步驟主要包括以下4個(gè)基本步驟：樣品制備；電泳分離；蛋白的膜轉(zhuǎn)移；免疫雜交與顯色――蛋白檢測(cè)。溶液和試劑1.1X磷酸鹽緩沖液（PBS）2.ModifiedRIPAbuffer：Tris-HCl:50mM,pH7.4；NP-40:1%；Na-deoxycholate:0.25%；NaCl:150mM；EDTA:1mM；PMSF:1mM；Aprotinin,leupeptin,pepstatin:1microgram/mleach；Na3VO4:1mM；NaF:1m
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凝膠電泳操作注意事項(xiàng)1.緩沖系統(tǒng)：在沒有離子存在時(shí),電導(dǎo)率zui小,DNA不遷移,或遷移極慢,在高離子強(qiáng)度的緩沖液中,電導(dǎo)很高并產(chǎn)熱,可能導(dǎo)致DNA變性,因此應(yīng)注意緩沖液的使用是否正確.長(zhǎng)時(shí)間高壓電泳時(shí),常更新緩沖液或在兩槽間進(jìn)行緩沖液的循環(huán)是可取的.2.瓊脂糖：不同廠家、不同批號(hào)的瓊脂糖,其雜質(zhì)含量不同,影響DNA的遷移及熒光背景的強(qiáng)度,應(yīng)有選擇地使用.3.凝膠的制備：凝膠中所加緩沖液應(yīng)與電泳槽中的相一致,溶解的凝膠應(yīng)及時(shí)倒入板中,避免倒入前凝固結(jié)塊.倒入板中的凝膠應(yīng)避免出現(xiàn)氣泡,影響電泳結(jié)果
