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Ex?(nm)	559	Em?(nm)	635
儲存條件	在零下15度以下保存,?避免光照

熒光法脂滴檢測分析試劑盒 是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的用于脂滴檢測的試劑盒，脂質(zhì)液滴，也稱為脂質(zhì)體，油體或脂肪體，是富含脂質(zhì)的細(xì)胞器，可調(diào)節(jié)中性脂質(zhì)的儲存和水解。它們還充當(dāng)許多重要生物過程（如脂肪酸和細(xì)胞*）的脂質(zhì)來源的貯藏庫，以促進(jìn)能量，膜的形成和維持。細(xì)胞質(zhì)脂質(zhì)滴的異常積累發(fā)生在多種病理狀況中，并且可以指示代謝缺陷或發(fā)病機(jī)理。 AAT Bioquest的Cell Navigator 熒光脂質(zhì)滴測定試劑盒是一種簡單的測定方法，可以定量測量脂質(zhì)滴的積累。試劑盒中使用Nile Green 進(jìn)行親脂性染色。 Nile Green 在富含脂質(zhì)的環(huán)境中發(fā)出強(qiáng)烈的熒光，而在水性介質(zhì)中的熒光卻很少。它是使用熒光顯微鏡，流式細(xì)胞儀或熒光酶標(biāo)儀檢測細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)滴的的重要染色劑。與具有廣泛熒光光譜的尼羅河紅不同，尼羅河綠僅用綠色熒光染色細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)小滴。它可以與其他熒光染料一起用于多色染色。使用FITC濾光片組可以觀察到綠色熒光信號。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供的熒光法脂滴檢測分析試劑盒 。

適用儀器

熒光顯微鏡
Ex:	TRITC 濾波片組
Em：	TRITC 濾波片組
推薦孔板:	黑色透明底板
熒光酶標(biāo)儀
Ex:	550 nm
Em：	640 nm
Cutoff：	610 nm
推薦孔板:	純黑色孔板

實(shí)驗(yàn)方案

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡要概述

用測試化合物準(zhǔn)備細(xì)胞
添加Nile Green 工作溶液
在室溫或37°C下孵育10至30分鐘
讀取熒光強(qiáng)度

溶液配制

1.工作溶液配制

通過將5 µL 200X Nile Green （組分A）稀釋到1 mL染色緩沖液（組分B）中來制備Nile Green 工作溶液。注意：50 µL的Nile Green （組分A）足以容納一個96孔板。避光。 Nile Green 的濃度取決于具體應(yīng)用。可以根據(jù)特定的細(xì)胞類型和細(xì)胞或組織對探針的滲透性來改變?nèi)旧珬l件。

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樣品示例及操作

1.對于貼壁細(xì)胞：

1.1在96孔黑色壁/透明底板（100 µL /孔/ 96孔）中或在裝有適當(dāng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿內(nèi)的蓋玻片上生長細(xì)胞。

1.2輕輕吸出培養(yǎng)基，并加入等體積（例如100 µL /孔/ 96孔板）的Nile Green 染色溶液。

1.3將細(xì)胞在37°C，5％CO2培養(yǎng)箱中孵育10-30分鐘。

1.4去掉Nile Green 工作溶液（可選）。

1.5用酶標(biāo)儀讀取485/520 nm處的熒光，或使用帶有FITC濾光片組的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。

2.對于懸浮細(xì)胞：

2.1將細(xì)胞以1000 rpm的速度離心5分鐘，以得到每管1-5×105個細(xì)胞。

2.2在500 µL Nile Green 工作溶液中重懸細(xì)胞。

2.3在避光條件下，于室溫或37°C孵育10至30分鐘。

2.4離心除去Nile Green 工作溶液，然后將細(xì)胞重懸于500 µL預(yù)熱的培養(yǎng)基或您選擇的緩沖液中，以使每管1-5×105個細(xì)胞（可選）。

2.5使用帶有FITC濾光片組或流式細(xì)胞儀在FL1通道的熒光顯微鏡監(jiān)控?zé)晒獾脑黾印?/span>