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當前位置：西安百螢生物科技有限公司>>熒光成像>> 17310ReadiLink iFluor 488 FISH 熒光成像試劑盒
ReadiLink iFluor 647 FISH 熒光成像試劑盒
ReadiLink iFluor 555 FISH 熒光成像試劑盒
ReadiLink iFluor 488 FISH 熒光成像試劑盒
熒光原位雜交( FISH )技術是檢測生物樣本中特定核酸靶標的有效工具。核酸靶標的原位檢測是通過互補序列的熒光染料標記的核酸探針與樣品雜交實現的。ReadiLink iFluor 488 FISH 熒光成像試劑盒是使用iFluor 488標記的FISH探針通過原位雜交標記目標DNA的便捷工具。ReadiLink iFluor 488 FISH 熒光成像試劑盒提供Taq DNA聚合酶，通過聚合酶鏈式反應( Polymerase Chain Reaction，PCR )將iFluor ® 488 - dUTPs摻入目標DNA中。我們的iFluor 染料比傳統的熒光標記物更亮、更穩定，提供了所需的分辨率和信號。
適用儀器
| Thermal Cycler | |
| 推薦孔板: | PCR微孔板 |
操作步驟
使用前，將所有組分解凍至室溫，渦旋充分混合。
注：以下方案可作為標準DNA FISH的通用指南。請根據自己的實驗進行方案的修改或優化。
1.配制如下反應混合液，見表1
每個反應每孔的試劑組成
| 成分 | 體積 (25 µL/反應) | 最終濃度 |
| FISH反應混合物 (2X) | 12.5 µL | 1X |
| 上游引物, 10 µM | 0.25-2.5 µL | 0.1-1.0 µM |
| 下游引物, 10 µM | 0.25-2.5 µL | 0.1-1.0 µM |
| 模板DNA | 1-5 µL | 優化濃度 |
| iFluor 488-dUTP | 2.5 µL | |
| dNTP 混合物 | 1 µL | |
| 水，無核酸酶 | 25 µL |
2.通過緩速渦旋，然后用短暫的離心機小心地混合試劑
3.在qPCR儀中置板，按下表2操作
表2 .熱循環參數
參數 | 聚合酶活化 | PCR (30-40 個周期) | ||
持續溫度 | 變性 | 退火 | 延長 | |
溫度 | 95 °C | 95 °C | 55-65 °C | 68-72 °C |
時間 (m:ss) | 0:20 | 0:30 | 1:00 | 1:00 |
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