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Ex?(nm)	652	Em?(nm)	670

Cell Navigator 細(xì)胞膜染色試劑盒紅色熒光是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的用于染色細(xì)胞膜的試劑盒，Cell Navigator 細(xì)胞膜染色試劑盒可快速，均勻地標(biāo)記質(zhì)膜，而沒(méi)有凝集素表現(xiàn)出的細(xì)胞類型差異。它可以用作HCS（高含量篩選）的分割工具，以及對(duì)細(xì)胞質(zhì)膜進(jìn)行染色以用于標(biāo)準(zhǔn)熒光顯微鏡檢查。試劑盒中使用的染色劑可以固定，但不能通透，因此不適用于還涉及通過(guò)抗體探測(cè)內(nèi)部靶標(biāo)的實(shí)驗(yàn)。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供的Cell Navigator 細(xì)胞膜染色試劑盒紅色熒光。

適用儀器

熒光顯微鏡
Ex:	Cy5 濾波片組
Em：	Cy5 濾波片組
推薦孔板:	黑色透明底板

實(shí)驗(yàn)方案

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡(jiǎn)要概述

1.在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中準(zhǔn)備細(xì)胞
2.將細(xì)胞與Cellpaint 深紅色工作溶液在37°C下孵育10-20分鐘
3.在熒光顯微鏡下以Ex / Em = 640/660 nm（Cy5濾光片組）分析細(xì)胞

溶液配制

1.儲(chǔ)備溶液配制

所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C下。避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 Cellpaint 深紅色原液（500X）：
將100 µL DMSO（組分C）添加到Cellpaint 深紅色（組分A）的小瓶中，制成500X Cellpaint Deep Red儲(chǔ)備液。注意：避光。為了存放，請(qǐng)將管子緊緊密封。

2.工作溶液配制

將20 µL 500X Cellpaint 深紅色原液添加到10 mL的測(cè)定緩沖液（組分B）中，并充分混合以制成Cellpaint Deep Red工作溶液。這種Cellpaint 深紅色工作溶液在室溫下至少可穩(wěn)定8小時(shí)。避光。注意：20 µL 500X Cellpaint 深紅色500X儲(chǔ)備液足以用于一個(gè)96孔板。

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樣品示例及操作

1.在細(xì)胞板中加入100 µL /孔（96孔板）或50 µL /孔（384孔板）的Cellpaint 深紅色工作溶液。

2.避光保存，在37°C下孵育細(xì)胞10-20分鐘。注意：細(xì)胞膜探針的濃度取決于具體應(yīng)用。可以根據(jù)特定的細(xì)胞類型和細(xì)胞或組織對(duì)探針的滲透性來(lái)改變?nèi)旧珬l件。

3.除去每個(gè)孔中的Cellpaint 深紅色工作溶液。

4.用生理緩沖液（例如HHBS，PBS或您選擇的緩沖液）洗滌細(xì)胞3次。

5.染色后固定細(xì)胞（可選）。用4％甲醛固定細(xì)胞15-30分鐘。用生理緩沖液洗滌細(xì)胞三遍。

6.使用裝有Cy5濾光片組（Ex / Em = 640/660 nm）的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞中的熒光信號(hào)。