樣本分析方案

簡要概述

1.在生長培養基中制備細胞
2.用ER Green red工作溶液在37oC孵育細胞15-30分鐘
3.在Ex / Em = 590 / 620nm（Texas Red濾光片組）下在熒光顯微鏡下分析細胞

溶液配制

1.儲備溶液配制

       除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。 避免反復凍融循環。
ER Green 原液（500X）：
將20μLDMSO（組分C）加入到ER red （組分A）的小瓶中并充分混合以制備500X ER red 儲備溶液。 注意：20μL的500X ER red 原液足以容納一個96孔板。 如果管子密封，未使用的500X ER red 儲備溶液可以在≤-20oC下儲存兩周。 避光。

2.工作溶液配制

將20μL500XER red 儲備溶液加入10 mL活細胞染色緩沖液（組分B）中，充分混合，制成ER red 工作溶液。 該ER red 工作溶液在室溫下穩定至少2小時。 避光。有關細胞樣品制備的指南，請點擊查看。

操作步驟

1.在細胞板中加入100μL/孔（96孔板）或50μL/孔（384孔板）的ER red 工作溶液。 用37℃的工作溶液孵育細胞15-30分鐘，避光。 注意：ER探針的濃度根據具體應用而有所不同。 濃度高于工作溶液可能對細胞有毒。 可以根據特定細胞類型和細胞或組織對探針的滲透性來修改染色條件。

2.在每個孔中移除ER red 工作溶液。 用物理相關緩沖液洗滌細胞三次。

3.染色后修復細胞（可選）。 用4％甲醛固定細胞5-10分鐘。 用物理相關緩沖液洗滌細胞三次。

4.使用具有Texas Red濾光片組（Ex / Em = 590 / 620nm）的熒光顯微鏡觀察細胞中的熒光信號。

數據分析