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Cell Explorer 活細(xì)胞示蹤試劑盒橙色熒光是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的用于標(biāo)記活細(xì)胞的試劑盒，我們的Cell Explorer 活細(xì)胞示蹤試劑盒使用專有的橙色熒光染料，當(dāng)進(jìn)入活細(xì)胞時(shí)，該熒光染料會(huì)增強(qiáng)熒光。該染料是疏水性化合物，易于滲透完整的活細(xì)胞。細(xì)胞內(nèi)酯酶對(duì)弱熒光底物的水解產(chǎn)生了強(qiáng)烈熒光的親水性產(chǎn)物，該產(chǎn)物被很好地保留在細(xì)胞質(zhì)中。跟蹤染料具有良好的光穩(wěn)定性和強(qiáng)大的成像性能。該試劑盒特別適用于細(xì)胞的多色流式細(xì)胞分析。它也可以與配備TRITC濾光片試劑盒的熒光顯微鏡一起使用。該試劑盒為細(xì)胞功能的流式細(xì)胞術(shù)和熒光顯微鏡研究提供了標(biāo)記細(xì)胞的有效工具。細(xì)胞的有效標(biāo)記為研究時(shí)空背景下的細(xì)胞事件提供了一種有力的方法。該試劑盒可用于多種研究，包括細(xì)胞粘附，趨化性，多藥耐藥性，細(xì)胞生存力，細(xì)胞凋亡和細(xì)胞毒性。該試劑盒為所有基本組件提供了優(yōu)化的細(xì)胞標(biāo)記方案。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供的Cell Explorer 活細(xì)胞示蹤試劑盒橙色熒光。

適用儀器

流式細(xì)胞儀
激發(fā)：	488 nm or 532 nm激光
發(fā)射：	575/26 nm濾波片
通道：	PE通道

熒光顯微鏡
激發(fā)：	540nm
發(fā)射：	570nm
推薦孔板：	黑色透明
濾波片：	Cy3/TRITC濾波片

實(shí)驗(yàn)方案

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡(jiǎn)要概述

1.準(zhǔn)備樣品并從培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞
2.在每個(gè)孔中添加10 µL /孔的10X Track It Orange工作溶液
3.在室溫下將細(xì)胞染色15分鐘至1小時(shí)
4.清洗細(xì)胞
5.在顯微鏡下在Ex / Em = 540/570 nm下檢查樣品

溶液配制

1.工作溶液配制

將500X Track It Orange DMSO儲(chǔ)備溶液（組分A）稀釋到測(cè)定緩沖液（組分B）中，制成10X至25X Track It Orange工作溶液。對(duì)于所有孔，應(yīng)以適當(dāng)?shù)臐舛纫?0 µL /孔制備足夠的工作溶液。例如，要使一個(gè)96孔微孔板的終濃度是Track It Orange的1X，可將20 µL Track It Orange DMSO儲(chǔ)備溶液稀釋到1 mL的測(cè)定緩沖液（組分B）中，制成1 mL的10X Track It Orange工作解決方案。注意：對(duì)于不同的細(xì)胞類型和/或?qū)嶒?yàn)條件，應(yīng)憑經(jīng)驗(yàn)確定Track It Orange工作溶液的濃度。建議以至少十倍以上的濃度進(jìn)行測(cè)試。

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樣品示例及操作

1.向細(xì)胞中加入10X Track It Orange工作溶液，其體積應(yīng)等于細(xì)胞培養(yǎng)基體積的1/10。例如，對(duì)于96孔板，將10μL/孔的10X Track It Orange工作溶液添加到細(xì)胞中。

2.將細(xì)胞在37°C，5％CO2培養(yǎng)箱中孵育15分鐘至1小時(shí)。

3.用Hanks和20 mM Hepes緩沖液（HBSS）或適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌細(xì)胞。

4.用生長(zhǎng)培養(yǎng)基填充細(xì)胞孔。

5.使用帶有TRITC濾光片組的熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀（Ex / Em = 540/570 nm）分析細(xì)胞。