樣品實驗方案

簡要概述

1.準(zhǔn)備堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)品和/或測試樣品（50μL）
2.添加ALP工作溶液（50μL）
3.在室溫或37°C孵育10 - 30分鐘
4.監(jiān)測400nm處的吸光度增加

溶液制備

1.儲備溶液

所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。 避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 pNPP儲備液（100X）：
將300μL蒸餾水加入pNPP小瓶（組分A）中。 好好混合。 應(yīng)立即使用pNPP儲備溶液。 注意：如果妥善保存，解決方案應(yīng)該有效期為3-4周。

1.2 堿性磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液：
添加100μL含0.1％BSA（H2O-0.1％BSA）的蒸餾水至堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)品（組分C，10單位），以產(chǎn)生100單位/ mL堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2.標(biāo)準(zhǔn)溶液

堿性磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)
將10μL100單位/ mL堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液加入990μLH2O-0.1％BSA中，生成1,000 mU / mL堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液。 然后取100μL的1,000 mU / mL堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行1:10稀釋，得到100 mU / mL堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液（AS7）。 然后進(jìn)行1：3連續(xù)稀釋以獲得剩余標(biāo)準(zhǔn)品（AS6-AS1）。 注意：應(yīng)丟棄未使用的稀釋堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液部分。

3.工作溶液

將50μLpNPP儲備溶液（100X）加入5mL測定緩沖液（組分B）中，使總體積為5.05mL的pNPP工作溶液。