細胞:AU565細胞
中文名稱:人乳腺癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
AU565細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
(網絡信息主針對網絡推廣作用,僅供參考,細胞培養請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
長期以來相信雌性哺乳動物生來就具有有限的卵母細胞,并且不能補充。(通派細胞庫供應:HSF細胞)成年小鼠的卵巢能更新卵母細胞。那些更新卵母細胞來源血液循環中的干細胞,并且這些干細胞來源于骨髓。
如果該假設得到證實,將總體上扭轉我們的想法。(通派細胞庫供應:P815細胞)為了研究清楚循環細胞(circulating cells)是否會轉變成成熟的卵母細胞,利用外科手術將野生型小鼠和能表達綠色熒光蛋白(GFP)的小鼠聯結構成連體小鼠——連體小鼠共用一個循環系統。
這對連體小鼠在年齡為4-8周的時候被聯結在一起,(通派細胞庫供應:HSC細胞)并且連體持續6-8個月。之后正如預想的那樣,連體小鼠中的每個成員均具有gfp陽性和野生型血液細胞。
研究者誘導小鼠排卵,然后收集排出的卵母細胞,(通派細胞庫供應:HSG細胞)他們發現野生型小鼠中沒有GFP陽性的卵母細胞,反過來也一樣。
發現一些與卵母細胞關聯的細胞來源于另外的連體伙伴。(通派細胞庫供應:HSY細胞)對這些細胞進行染色,均為CD45陽性。
研究者重復他們的實驗,(通派細胞庫供應:A2780細胞)所不同的是預先用化療處理小鼠,觀察是否骨髓、卵巢的受傷,或者精仔細胞能夠誘導卵母細胞的再生。
他們再一次發現沒有GFP陽性細胞交叉進入野生型伙伴中去成為成熟的卵母細胞。(通派細胞庫供應:HL60細胞)研究將GFP轉基因細胞骨髓移植給野生型小鼠,這些小鼠是預先用化療藥物或者低劑量的放射性處理消毒的。
在這些野生型小鼠體內發現GFP陽性血液細胞,(通派細胞庫供應:GC-2細胞)但沒有發現GFP陽性卵母細胞。
很有可能起源于骨髓的不成熟的卵母細胞有助于卵巢營造一個排卵所必需的內分泌環境。(通派細胞庫供應:C26細胞)用化療處理的小鼠的研究結果不同意這種推測,因為不過是連體還是骨髓移植,都不能增加內源性的排卵。