細胞:Calu-1細胞
中文名稱:人肺癌細胞
生長特性:貼壁細胞
Calu-1細胞培養基:1640 培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
Calu-1細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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腦是一個復雜的系統。在胚胎發育過程中,大量的神經細胞是依靠什么樣的機制來協調它們的運動遷移并排列組合成有序的組織結構,一直吸引著研究者們濃厚的興趣。
發現高度極性的神經細胞在定向遷移過程中,需要一種長距離的細胞內信號傳遞過程,協調神經細胞的不同部位對外界導向信號的反應。(CCLP1細胞培養條件:90%高糖DMEM、10%胎牛血清、貼壁細胞)
他們觀察到,遷移神經細胞前方的生長錐是前方信號的部位,在自發遷移的神經細胞前方遭遇排斥性的神經導向因子Slit時會發生顯著的躲避反應——生長錐首先 “撤退”,然后胞體停止前進,并調轉方向,最終細胞朝相反方向逃逸而去。
在這個過程中,會發生一個長距離的細胞內鈣波“通訊”,首先是Slit在生長錐內“點燃”鈣離子“烽火”,緊接著是鈣離子“烽火”從生長錐傳遞到后方的胞體,通知胞體前方的“敵情”,進而通過調節胞體部位的一種小分子GTP酶RhoA的活性和分布,使細胞體掉頭向后“撤退”。(CCRF-CEM細胞培養條件:90% RIMP1640、Penicillin/Streptomycin、10% 胎牛血清、懸浮細胞、人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞)
正是這個鈣波信號協調了運動中的神經細胞各部分對外界排斥性因子Slit的逃避反應。目前已知多種發育性神經系統疾病是由于神經細胞遷移紊亂造成的,患者常表現出智障、癲癇等癥狀。
因此,對神經細胞遷移導向基本機制的研究將有利于人們對這類發育性神經系統疾病的認識和防治。