植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A試劑盒說明書

【資料簡介】

主要用途

 植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶活性直接光度法定量檢測試劑是一種旨在運用3-羥-3-甲戊二酰輔酶A作為底物，在還原酶的催化下，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化后吸光峰值的降低，即采用光度法來測定植物裂解樣品中酶活性的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種植物組織，包括種子（seed）、葉片（leaf）、根（root）、胚胎葉（cotyledon）、上胚軸（epicotyl）等裂解懸液、微粒體，或純化酶樣品3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶的活性檢測，以及抑制劑篩選。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定。

技術背景

甲戊二羥酸通路（mevalonate pathway），又稱為3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶通路或甲戊二羥酸依賴性通路，是所有高等真核生物和許多細菌具有的重要的細胞代謝通路，用于體內產生二甲基丙烯焦磷酸（dimethylallyl pyrophosphate；DMAPP）和異戊二烯焦磷酸（isopentenyl pyrophosphate；IPP）作為生物大分子合成的基礎，包括蛋白質異戊二烯化、細胞膜維護、激素合成、蛋白固著、蛋白糖化等。3-羥-3-甲戊二酰輔酶A還原酶（3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase；HMGR；EC1.1.1.34）是控制甲戊二羥酸通路的關鍵的酶，調節膽固醇和類異戊二烯脂分子的產生。HMG-COA還原酶位于內質網膜上，含有8個跨膜結構域，其中活性結構域在細胞漿里。HMG-COA還原酶是許多降脂藥物的靶標，包括lovastatin （Mevacor）、atorvastatin （Lipitor）、pravastatin（Pravachol）和simvastatin（Zocor）。在植物組織中，HMG-COA還原酶位于質體、線粒體和內質網上，含有2個跨膜結構域，組織發育、光照、病原菌感染、創傷等將誘導HMG-COA還原酶活性增加。在HMG-COA還原酶的催化下，將4個電子的3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原為甲戊二羥酸（mevalonate），同時產生還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate；NADPH）被氧化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（oxidized nicotinamide adenine dinucleotide phosphate；NADP），其氧化后的吸光峰值變化（340nm 波長），來定量分析3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶的活性。3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶反應系統為：