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ELISA實驗操作中常見問題之操作技術的影響

2012年10月24日 11:07:44人氣:252來源:上海天齊生物科技有限公司

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【資料簡介】

ELISA實驗操作中常見問題之操作技術的影響:

 

操作過程的控制:

⑴ 嚴格按照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡3060min。

 

⑵ 加樣后及時放人孵箱。標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。

 

(3)封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發,產生周邊現象從而導致花板的出現。

 

(4)用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙選擇干凈、無或少塵的吸水材料上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產生拖帶現象而導致花板的出現。

 

(5)合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。

 

6)加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

 

(7)顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。

 

(8)加樣時保持顯色劑不外流;AB液應避免接觸金屬器械。加終止液時應避免產生氣泡。

 

(9)應保證酶標板清潔,整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的措施可以使花板降至zui低限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準確、可靠的實驗結果。

 

 

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