花青素（Anthocyan）檢測試劑盒說明書

【資料簡介】

花青素(Anthocyan)檢測試劑盒(微板法)

產品簡介：

花青素(anthocyan,cyanidin)又稱花色素（anthocyanidin），屬黃烷衍生物，溶解于

細胞液中，是植物體內廣泛分布的花色素之一，是花色素苷(anthocyains, anthocyanin) 水

解而得的有顏色的苷元。植物體內存在花青素、葉綠素、類胡蘿卜素、類黃酮、酚類等物質

與花、果實和葉片的顏色有關，而且與果實等樣品衰老過程密切相關，對其加工性能、存儲、

營養價值等都有重要影響。

植物花青素檢測試劑盒(微板法)檢測原理是花青素溶于有機溶劑，以有機溶劑

粗提花青素，花青素在酸性溶液中呈紅色，顏色深淺與花青素含量呈正比，于 530nm 有

大吸收波，可利用酶標儀測定其吸光度，進而計算出花青素的含量，方法簡單易行。因組織

中花青素種類不同，所需標準品亦不同，本產品不含標準品，因此只能檢測花青素的相對含

量。如需檢測樣品中花青素的準確含量，請自備對應種類的花青素標準品。本試劑盒主要用

于植物組織或果實中花青素的提取以及定量檢測花青素相對含量。該試盒僅用于科研領域，

不宜用于診斷或其他用途。

產品組成：

名稱                                                 100T                               Storage

Anthocyan Assay Buffer              2×500ml                               RT

使用說明書                                        1 份

自備材料：

1、實驗材料：桃子、李子、蘋果、杏等果實或其他植物組織

2、研缽或勻漿器

3、離心管、離心機

4、濾紙或紗布

5、96 孔板

6、酶標儀

操作步驟(僅供參考)：

1、花青素提取：

方法一：

①4℃預冷研缽或勻漿器，以及 Anthocyan Assay Buffer。

編號

名稱

100T

Storage

Anthocyan Assay Buffer

2×500ml

RT

使用說明書

1 份②取植物組織，洗凈，擦干，稱取新鮮樣品 0.25g，剪碎，置于研缽或勻漿器中。

③加入 2~3ml Anthocyan Assay Buffer，充分研磨或勻漿后轉入 10ml 離心管，用

Anthocyan Assay Buffer 沖洗研缽或勻漿器并轉移至離心管，補加 Anthocyan Assay

Buffer 至 8ml。

④4℃避光靜置 20min， 期間搖動 2~3 次，然后過濾至離心管，也可用離心機

8000r/min 離心 3min，濾液（上清液）即為花青素粗提液。

方法二：

將樣品按上述比例加入提取液中，置于 32℃溫箱浸提 4~8h(期間可搖動數次) ，或室

溫下避光浸提 24h，離心取上清即為花青素粗提液。

2、加樣及測定：取 96 孔板，用 Anthocyan Assay Buffer 做空白對照，取花青素提取液

（200~300ul）用酶標儀在 530nm 波長處讀取吸光度值。如果花青素濃度過高，可以

減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定，樣品的檢測好能設置 2 平行孔，求平均值。

計算：

花青素單位定義：以 OD 值為 0.1 時的花青素濃度稱為一個單位(U)。計算方法如下：

組織樣品的花青素含量(U/g)=(A 測定-A 空白)/(0.1xW)

式中：A 測定=花青素提取液在 530nm 的 OD 值

A 空白=空白對照在 530nm 的 OD 值

W=樣品鮮重(g)

亦可用自備的花青素標準品做梯度稀釋(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1mg/ml)，用

Anthocyan Assay Buffer 做空白對照，繪制標準曲線，進而計算出樣品中花青素的含量。

組織樣品的花青素(mg/g)={C×VT}/(W×V1)

式中：C=根據標準曲線求得的測定管花青素含量(mg/ml)

VT=花青素粗提液總體積(ml)=8

V1=加樣時所用花青素粗提液的體積(ml)

W=樣品鮮重(g)

液體樣品的花青素(mg/ml)=C×N/V

式中：C=根據標準曲線求得的測定管花青素含量(mg/ml)

V=加樣時所用花青素粗提液的體積(ml)

N=稀釋倍數

注意事項：

1、 為了避免花青素見光發生變化，操作時應盡量避光，研磨或勻漿應盡量縮短時間。

2、 取樣量、試劑用量應根據花青素含量適當調整。3、 Anthocyan Assay Buffer 應密閉保存，避免有效成分揮發。

4、 如果沒有酶標儀，也可以使用分光光度計測定。

5、 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期：12 個月有效.