溴酚藍(lán)的配置方法

【資料簡介】

溴酚藍(lán)淺黃色到棕黃色粉末；易溶于氫氧化鈉溶液，溶于甲醇、乙醇和苯，微溶于水（約0.4g/100ml）；zui大吸收波長422nm，從乙酸及丙酮混合液中析出者為長六角形棱柱狀結(jié)晶。近似黃色或淺玫瑰色結(jié)晶性粉末，微溶于水及乙醚，溶于乙醇或稀堿液及氨液中呈藍(lán)色。PH變色范圍 3.0（黃）~4.6（藍(lán)紫） ，微溶于水，易溶于甲醇、乙醇和苯，可自由溶于氫氧化鈉溶液，同時形成溴酚藍(lán)鈉鹽水溶液。 是pH指示劑，pH=3.0時呈黃色，pH=4.6時呈藍(lán)紫色。酸堿指示劑；非水滴定用指示劑，蛋白電泳染色；病毒化驗(yàn)等。

 

溴酚藍(lán)的配置方法：

 

1.將托盤天平上稱取1g溴酚藍(lán)定溶于100ml無水乙醇中，轉(zhuǎn)移入滴瓶中，貼標(biāo)簽備用。

2.配western blot用的2*SDS上樣緩沖液需要用到0.1%的溴酚藍(lán)，2-DE中溴酚藍(lán)一般也是配成0.1%母液。實(shí)際上，溴酚藍(lán)在水中的溶解度不高，直接將0.1g溴酚藍(lán)溶于100ml水是有困難的。下面是其較合適的配制方法：0.05%的溴酚藍(lán)配制方法：取溴酚藍(lán)0.1g，加0.05mol/L氫氧化鈉溶液3.0ml使溶解，再加水稀釋至200ml，即得。 變色范圍pH2.8～4.6（黃→藍(lán)綠）。只是不知道加入NaOH會不會影響2-DE實(shí)驗(yàn)。估計(jì)影響不大，因?yàn)橹甘緞┯昧慨吘购苌佟?

3.加1g水溶性鈉型溴酚藍(lán)于100ml水中，攪拌或渦旋混合直到*溶解。溴酚藍(lán)其鈉鹽易溶解在水里。