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細胞適應無血清培養基過程的注意事項研究

時間:2014/7/31閱讀:751
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細胞適應無血清培養基過程的注意事項研究

  在細胞適應無血清培養基過程中,不要讓細胞生長過度。這將增加選擇亞群的可能性。需要注意,與有血清培養基相比,大部分SFM包含非常少的蛋白質,因而更易于受外界因素的影響。

  細胞培養適應替代血清:培養基許多細胞利用連續適應方法能很好的適應,用包含FBS的的培養基和包含有替代血清的培養基∶(v∶v)的混合培養基培養細胞。通過下列的混合培養基的方式,連續幾代減少當前培養基的量:∶2,∶4,∶6和00%替代培養基。每次適應改變血清比例時,傳代細胞2到3次。

  培養可以直接從FBS轉換到替代血清。一開始就使用相同于FBS的濃度的替代物或血清,生長的延遲可能會發生,4允許進行2到3次的傳代,使生長率恢復到以前的水平。

  特別需要強調的是:培養基配制無血清培養液必須使用高質量的水,如石英玻璃蒸餾器經三次蒸餾或超純水凈化裝置制備的水。因為無血清培養基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保護細胞的大分子,既便水中的有毒物質含量甚微,也可能對細胞產生致死性損害。這是無血清培養能否成功的關鍵因素之一。

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