【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?nbsp;
通過制片與觀察加深理解細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、吞噬等生理活動(dòng)。 
【實(shí)驗(yàn)用品】 
一、材料和標(biāo)本 雄性蟾蜍、小白鼠、l％雞血懸液、6％淀粉肉湯、草履蟲。 
二、器材和儀器 光鏡、2ml注射器、載玻片、蓋玻片、解剖器材、滴管、移液管、試管、玻璃片、黑紙。 
三、試劑 0.3％臺(tái)盼蘭、1％剛果紅。 
【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容】 
一、細(xì)胞的吞噬活動(dòng) 
(一)原理 
白細(xì)胞是機(jī)體防御系統(tǒng)中能游走的單位。它分為粒細(xì)胞系、單核細(xì)胞系、淋巴系三類。它們有許多生理功能，如游走性、變形運(yùn)動(dòng)、趨化性、吞噬異物等。在白細(xì)胞中，以粒細(xì)胞、單核細(xì)胞的吞噬活動(dòng)較強(qiáng)，故稱此二類細(xì)胞為吞噬細(xì)胞。單核細(xì)胞由血液進(jìn)入組織后逐漸演變成巨噬細(xì)胞。吞噬細(xì)胞主要靠吞噬來處理異物。吞噬細(xì)胞首先由于趨化作用而向異物游走，然后伸出偽足包圍異物，并發(fā)生內(nèi)吞作用形成吞噬泡將異物吞入細(xì)胞，繼而溶酶體與吞噬泡融合消化異物。 
(二)小白鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬活動(dòng)的觀察 
l．實(shí)驗(yàn)前二天，每天向小鼠腹腔注射6％淀粉肉湯O．5～1ml(含O．3％臺(tái)盼蘭，起標(biāo)記作用)，以刺激腹腔產(chǎn)生較多的巨噬細(xì)胞(此步由教師在實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行完畢)。 
2．實(shí)驗(yàn)時(shí)，每組取一只經(jīng)上述處理的小鼠，腹腔注射1％雞血懸液0．5～1ml，注射后輕揉小鼠腹部以使紅細(xì)胞懸液分散均勻。 
3．1小時(shí)后，用頸椎脫位法處死小鼠，迅速剖開小鼠腹壁，向腹腔注入O．5ml～1ml生理鹽水，用牙簽輕輕攪拌使生理鹽水與腹腔液混勻。 
4．用注射器抽取腹腔液，滴片，然后蓋上蓋片。 
5．鏡檢，高倍鏡下畫圖記錄所見結(jié)果。 
二、暗視野觀察細(xì)胞的纖毛和鞭毛運(yùn)動(dòng) 
(一)原理 
暗視野照明法是一種不使照射被檢物體的光線直接進(jìn)入物鏡的照明方法。常常用它來觀察沒有染色的活體細(xì)胞或膠體粒子。利用此照明法，在鏡檢時(shí)不能直接看到通過標(biāo)本的照明光線，只有被檢物體反射或衍射的光線進(jìn)入物鏡可以提高分辨率，在暗視野中可以看到明亮的被檢物體的存在和運(yùn)動(dòng)，但它們的內(nèi)部結(jié)構(gòu)卻看不清楚。 
(二)自制遮光板變普通顯微鏡為“簡(jiǎn)單的暗視野顯微鏡”。 
步驟： 
1．將顯微鏡聚光器調(diào)到zui高位，用低倍鏡調(diào)焦至清楚。 
2．取下目鏡，從鏡筒中觀察并調(diào)節(jié)光圈的大小，使其與鏡筒中所見物鏡的視野相等。 
3．放一塊透明玻璃于載物臺(tái)透光孔上，用尺子測(cè)量光圈孔徑。 
4．按照?qǐng)D6--1的形狀，用黑紙剪成與調(diào)節(jié)后光圈孔徑一樣大小的遮光板。 
5．將遮光板放置在顯微鏡的濾光框上，即可進(jìn)行標(biāo)本的暗視野觀察。 
注：如果使用高倍鏡觀察標(biāo)本時(shí)，應(yīng)按高倍鏡調(diào)焦的視野大小重新制作遮光板。 
細(xì)胞生理活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)觀察
圖6—1遮光板 
a．光圈孔徑 
b．濾光片直徑 
(三)觀察蟾蜍上頜粘膜上皮細(xì)胞的纖毛運(yùn)動(dòng) 
步驟： 
1．用搗毀腦脊髓的方法處死蟾蜍。 
2．腹部向上將蟾蜍固定在蠟盤上。 
3．沿蟾蜍二側(cè)口角向后剪開約l厘米，將下頜翻轉(zhuǎn)固定在腹部。 
4．在上頜中線距喉頭1厘米處放置臘屑，觀察臘屑向什么方向移動(dòng)？記錄臘屑開始移動(dòng)到消失的時(shí)間(見圖6--2蟾蜍口腔內(nèi)面圖)。 
5．然后，用眼科剪刀剪取咽頭前部的上頜粘膜約2×2cm2小塊，用牙簽挑取剪下的粘膜，將縱切面貼于載片上。 
6．加一滴生理鹽水于載玻片標(biāo)本上，加蓋玻片，鏡檢。 
細(xì)胞生理活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)觀察
圖6—2 蟾蜍口腔內(nèi)面圖 
結(jié)果： 
1．在低倍鏡下觀察上頜粘膜細(xì)胞纖毛運(yùn)動(dòng)的現(xiàn)象。 
2．換高倍鏡仔細(xì)觀察纖毛有規(guī)律的運(yùn)動(dòng)。 
(四)暗視野觀察蟾蜍精子的鞭毛運(yùn)動(dòng)