凱氏定氮法常用于測(cè)定天然有機(jī)物（如蛋白質(zhì)，核酸及氮基酸等）的含氮量。 
天然的含氮有機(jī)物與濃硫酸共熱時(shí)，其中的碳、氫二元素被氧化成二氧化碳和水，而氮?jiǎng)t變成氨，并進(jìn)一步與硫酸作用生成硫酸銨。此時(shí)程稱(chēng)之為“消化”。 
但是，這個(gè)反應(yīng)進(jìn)行得比較緩慢，通常需要加入硫酸鉀或硫酸鈉以提高反應(yīng)的沸點(diǎn)，并加入硫酸銅作為催化劑，以促進(jìn)反應(yīng)的進(jìn)行。的消化過(guò)程可表示如下：

濃堿可使消化液中的硫酸銨分解，游離出氮，借水蒸汽將產(chǎn)生的氨蒸餾到一定量，一定濃度的硼酸溶液中，硼酸吸收氨后，氨與溶液中的氫離子結(jié)合，生成銨離子，使溶液中氫離子濃度降低。然后用標(biāo)準(zhǔn)無(wú)機(jī)酸滴定，直至恢復(fù)溶液中原來(lái)氫離子濃度為止，zui后根據(jù)所用標(biāo)準(zhǔn)酸的當(dāng)量數(shù)（相當(dāng)于待測(cè)物中氨的當(dāng)量數(shù)）計(jì)算出待測(cè)物中的氮量。
總氮量的測(cè)定——微量凱氏（Mirco
滴定時(shí)用甲烯藍(lán)和甲基紅混合指示劑，其指示范圍為pH5.2~5.6，將NH4H2BO3的藍(lán)色滴至原來(lái)H3BO3的藍(lán)紫色即為終點(diǎn)。 
本法適用范圍0.2~1.0毫克氮。相對(duì)誤差應(yīng)小于2%。 

三、材料、試劑與器具 
（一）材料 
人的血清或豬的血清 
（二）試劑 
1、濃硫酸（化學(xué)噸） 
2、30%氫氧化鈉（分析純）溶液 
3、0.9%NaCl溶液 
4、硫酸鉀—硫酸銅混合物：硫酸鉀與硫酸銅（CuSO4、5H2O）以3：1（W/W）的配比混合研磨成粉末。 
5、2%硼酸 
6、混合指示劑的配制： 
方法一：取50毫升0.1%甲烯藍(lán)無(wú)水醇溶液與200毫升0.1%甲基紅無(wú)水乙醇溶液混合配成，貯于棕色瓶備用，這種指示劑酸性時(shí)為紫色，堿性時(shí)為綠色，變色范圍窄且靈敏。 
方法二：0.1%溴甲酚綠乙醇溶液10毫升與0.1%甲基紅乙醇溶液2毫升混和即成。 
本指示劑的變色范圍為 紫紅色 灰色 綠色 
7．0.0100M HCl 
8. 硼酸一指示劑混合液：取100毫升2%硼酸溶液，滴加混合指示劑貯備液，搖勻后溶液呈現(xiàn)紫紅色即可。（約加1毫升左右混合指示劑） 
9.標(biāo)準(zhǔn)硫酸銨溶液（0.3毫克氮/毫升）