機(jī)體內(nèi)具有吞噬功能的細(xì)胞稱為吞噬細(xì)胞,它們是機(jī)體天然抵抗力的一個(gè)重要組成部分。人類吞噬細(xì)胞包括外周血中的中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞以及多種組織中的巨噬細(xì)胞,它們吞噬和殺滅侵入人體各部位的病源微生物和人體各部位衰老、損傷或癌變細(xì)胞。因此,吞噬細(xì)胞數(shù)量減少或功能障礙都會(huì)導(dǎo)致非特異性免疫缺陷,檢測(cè)其功能有助于診斷某些疾病和判斷機(jī)體非特異性免疫水平。
血液中的中性粒細(xì)胞通過(guò)趨化、調(diào)理、吞入和殺菌等幾個(gè)步驟,來(lái)吞噬和消化衰老、死亡細(xì)胞及病源微生物等異物。
【材料】
1. 白色葡萄球菌8小時(shí)培養(yǎng)物,用生理鹽水制成菌懸液,并離心洗滌2次,用標(biāo)準(zhǔn)比濁管
比濁,使菌體濃度達(dá)到5×108個(gè)/ml。
2. 肝素,生理鹽水,瑞氏染液。
3. 載玻片,滴管,血清瓶。
4. 小白鼠1~2只。
【方法】
1. 從小白鼠眼內(nèi)取血2ml左右,放入加有肝素(1%)數(shù)滴的血清瓶?jī)?nèi),然后在血清瓶?jī)?nèi)
加入等體積的白色葡萄球菌菌懸液,輕輕混合后,放入37℃水浴孵育30分鐘,每15分鐘搖勻一次。
2. 取血清瓶中白細(xì)胞層(即沉淀的紅細(xì)胞表層)白細(xì)胞懸液1滴,滴在載玻片一端,然后
用另一塊載玻片將這滴懸液推向另一端,成為一薄層。
3. 在薄層上滴數(shù)滴瑞氏染液,染色1分鐘;然后加等量蒸餾水,輕輕吹打,與瑞氏染液混
合染5分鐘后水洗晾干(水洗時(shí)為防止染液結(jié)晶沉著,應(yīng)加滿水后再傾斜倒掉水)。
4. 用油鏡檢查中性粒細(xì)胞的吞噬情況(見(jiàn)圖1-2)。
【結(jié)果判斷】
1. 吞噬百分?jǐn)?shù) 計(jì)數(shù)100個(gè)中性粒細(xì)胞中吞噬白色葡萄球菌的細(xì)胞數(shù)。
2. 吞噬指數(shù) 計(jì)數(shù)100個(gè)中性粒細(xì)胞中被吞噬的細(xì)菌總數(shù),平均每個(gè)中性粒細(xì)胞吞噬的細(xì)
菌數(shù)。
中性粒細(xì)胞的吞噬作用
圖1-1中性粒細(xì)胞是數(shù)量zui多的白細(xì)胞。其突出特點(diǎn)是細(xì)胞核分葉,常分2-5葉(b-d),葉間有染色質(zhì)細(xì)絲相連;也有的呈桿狀核(a)。一般認(rèn)為,核分葉越多,細(xì)胞越衰老。中性粒細(xì)胞的另一特點(diǎn)為淡紅色的胞質(zhì)內(nèi)含細(xì)小的淡紫色及淡紅色顆粒。前者較大,為嗜天青顆粒,光鏡下易見(jiàn);后者為特殊(中性)顆粒,較小,因染色很淡而難以觀察。血涂片,Giemsa染色。