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組織中抗壞血酸(維生素C)的測定實驗

時間:2013/9/18閱讀:850
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維生素C(vitaminc)又稱為抗壞血酸,一般水果、蔬菜中維生素C的含量均較高,不同的水果、蔬菜品種,以及同一品種在不同栽培條件、不同成熟度等情況下,其維生素C的含量都有所不同。測定維生素C含量,可以作為果蔬品質指標之一。

Ⅰ.滴定法
原理
維生素C具有很強的還原性,染料2,6-二氯酚靛酚(2,6-dichlorophenolindophenol)具有較強的氧化性,且在酸性溶液中呈紅色,在中性或堿性溶液中呈藍色。因此當用藍色的堿性2,6-二氯酚靛酚溶液滴定含有抗壞血酸的草酸溶液時,其中的抗壞血酸可以將2,6-二氯酚靛酚還原成無色的還原型。但當溶液中的抗壞血酸*被氧化之后,則再滴2,6-二氯酚靛酚就會使溶液呈紅色。借此可以指示滴定終點,根據(jù)滴定用去的標準2,6-二氯酚靛酚溶液的量,可以計算出被測樣品中抗壞血酸的含量 
二、材料、設備及試劑
(一)材料:水果或蔬菜
(二)設備:1. 蒸發(fā)皿;2. 小研缽及杵一套;3. 移液管;4. 漏斗;5. 濾紙;6. 容量瓶;7. 微量滴定管。
(三)試劑:1. 2%草酸;2. 2,6-二氯酚靛酚
三、實驗步驟
(一)稱取水果和蔬菜樣品10g,放在研缽中加入2%草酸溶液約5ml研碎。通過漏斗將研碎的樣品倒入一只100ml的容量瓶中,研缽及杵用2%草酸沖洗,并將洗液一并倒入該容量瓶中,zui后用2%草酸定容到刻度,過濾,濾液備用。
(二)染料的標定:取10ml標準抗壞血酸溶液至蒸發(fā)皿中,以2,6-二氯酚靛酚溶液滴定呈粉紅色,并在30S內不退色為終點。計算1ml染料相當于抗壞血酸的mg數(shù)(重復3次,取平均值)。
(三)取濾液10ml于蒸發(fā)皿中,用已標定過的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至粉紅色并且在30S內不褪色為止,記下染料的用量(重復3次,取平均值)
四、計算
W(mg/100g鮮樣)=(y0-y1)×A×Z/(B×X)×100
W—100g樣品中含VC的mg數(shù);y1—滴定空白所用染料ml數(shù);y0—滴定樣品所用染料ml數(shù);A—1ml染料溶液相當?shù)目箟难岬膍g數(shù);B—樣品的g數(shù);X—滴定時吸取樣品溶液的ml數(shù);Z—樣品溶液定容后的總體積(ml數(shù))。

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