人血清白蛋白（HSA）是人血漿中酸性藥物的重要載體之一，并且已表現出可逆地結合大量不同的化合物。已為HSA確定了幾個不同的配體結合位點。其中，Site II被確定為主要的藥物結合位點之一。人血清白蛋白（HSA）Site II結合測定試劑盒是一種基于熒光的高通量測定法，用于確定小分子與HSA的結合。該測定法基于新型熒光探針HSA Blue™S2。它的特征是具有特別的光譜和結合特性，可結合至HSA的位點2。HSA Blue™S2在蛋白質結合狀態和蛋白質未結合狀態之間顯示出較大的熒光強度差異。在HSA Blue™S2存在下，小分子競爭結合HSA導致熒光強度低。該測定法可用作高通量篩選工具，以確定在II位點與HSA的總結合。百螢生物為您提供優質的人血清白蛋白（HSA）Site II結合測定試劑盒。

樣品分析方案

概述

向孔中添加HSA工作溶液（50 µL）和HSA Blue™S2工作溶液（50 µL）

向各個孔中添加各種濃度的測試藥物（50 µL）

在室溫下孵育15至45分鐘

使用熒光酶標儀在Ex / Em = 365/480 nm（截止= 435 nm）下測量響應

儲備溶液配制

工作溶液配制

操作步驟

以下協議可用作指導，應根據需要進行優化。

1. 在孔中加入50 µL HSA Blue™S2工作溶液。

2. 在孔中加入50 µL HSA工作溶液。

3. 在各自的孔中加入50 µL藥物工作溶液。（總體積= 150 µL /孔）。

4. 將樣品在室溫下孵育30分鐘。

5. 使用熒光酶標儀在Ex / Em = 365/480 nm（截止= 435 nm）處檢測熒光的增加。