ReadiUse 6色 人 TBNK抗體試劑盒利用干燥的多色珠子通過流式細(xì)胞術(shù)鑒定淋巴細(xì)胞亞群、CD4+ T 細(xì)胞、CD8+ T 細(xì)胞、B 細(xì)胞和 NK 細(xì)胞。 該試劑含有針對人 CD3、CD4、CD8、CD16、C19、CD45 和 CD56 的熒光標(biāo)記抗體。 該試劑盒旨在以“裂解/免洗"形式用于分析人類全血。 還包括用于識別死細(xì)胞的活性染料和用于確定淋巴細(xì)胞亞群細(xì)胞濃度的熒光計數(shù)珠的數(shù)量。百螢生物為您提供優(yōu)質(zhì)的ReadiUse 6色 人 TBNK抗體試劑盒。

操作方案

概述

儀器
ReadiUse 6-Color Human TBNK Antibody Kit 設(shè)計用于配備適當(dāng)計算機(jī)硬件和軟件的流式細(xì)胞儀。 流式細(xì)胞儀必須配備：
1.488 nm 藍(lán)色激光和 635 nm 紅色激光
2.能夠檢測光散射（正面和側(cè)面）
3.488nm 激光激發(fā)時的四色熒光通道：FITC、PE、PerCP-Cy5.5 和 PE-Cy7
4.635nm 激光激發(fā)時的雙色熒光通道：APC 和 APC-Cy7
5.可選：405nm 紫激光，配備 455nm 檢測通道

規(guī)格

防范措施
1.該試劑含有疊dan化鈉。 吞食疊dan化鈉是有害的 (R22)。 如果吞食，請立即就醫(yī)。 與酸接觸會釋放有毒氣體。 疊氮化物在處理過程中應(yīng)用大量水沖洗，以避免鉛或銅管道中的沉積物。
2.10X Lyse/Fix Buffer（組分 B）含有甲醛。 甲醛有毒，避免吸入或接觸。
3.所有血液樣本都被視為生物危害品。請按照當(dāng)?shù)叵嚓P(guān)規(guī)定處理。

工作溶液的配制

1X 裂解/修復(fù)緩沖液
通過向 10X 裂解/固定緩沖液瓶（組分 B）中加入 3.0 mL 去離子水來制備 1X 裂解/固定緩沖液。 將瓶子混合并重新標(biāo)記為 1X Lysis/Fix Buffer。

樣品制備
1.制備血細(xì)胞樣本，可以使用在 EDTA 管中收集的新鮮血液或濃度不超過 106 個細(xì)胞/mL 的分離 PBMC。
2.從袋中取出所需數(shù)量的試劑管并重新密封袋。
3.全部混合樣品并將 50 μL 的樣品準(zhǔn)確分配到試劑管中。注意樣品分配的準(zhǔn)確性將影響確定的細(xì)胞濃度的準(zhǔn)確性。
4.輕輕渦旋每個管 30 秒，以確保干燥的試劑全部溶解。
5.在室溫下孵育 20 分鐘。保護(hù)管免受直射光。
6.在每個試管中加入 450 µL 1X Lysis/Fix Buffer 并渦旋 10 秒。將試管避光至少 15 分鐘。
7.以低速渦旋樣品管并加載到細(xì)胞儀上進(jìn)行分析。 該抗體試劑盒，設(shè)計用于裂解/免洗形式。如果在分析前清洗樣品，將失去確定細(xì)胞濃度的能力。
8.流式細(xì)胞儀采集：根據(jù)制造商的說明啟動和操作流式細(xì)胞儀。使用適當(dāng)?shù)募?xì)胞儀專用軟件分析數(shù)據(jù)。