產(chǎn)品基本信息

產(chǎn)品名稱：5-Propargylamino-3'-azidomethyl-dUTP

儲存條件：-15℃避光防潮

保質(zhì)期：24個月

產(chǎn)品物理化學(xué)光譜特性

分子量：576.24

溶劑：水

產(chǎn)品介紹

5-Propargylamino-3'-azidomethyl-dUTP是制備用于下一代測序（NGS）的熒光綴合物的關(guān)鍵組成部分。 NGS使用與早期Sanger測序相似的鏈終止方法，但NGS是通過熒光標(biāo)記的核苷酸類似物作為擴增反應(yīng)的可逆終止劑來進(jìn)行的。 NGS依賴于可逆的DNA聚合阻斷，而Sanger測序則使用ddNTP不可逆轉(zhuǎn)的DNA聚合阻斷。 NGS的另一個不同特征是通過橋式PCR進(jìn)行體外克隆擴增以增加待測序分子的數(shù)量。在此平臺上，片段與固定在固體表面上的引物連接，進(jìn)行原位擴增，生成具有相同分子的DNA簇。在每個循環(huán)中，同時添加可逆終止的四個核苷酸，并通過它們互補的聚合酶摻入。通過將3'-OH基團(tuán)替換為3'-o-疊氮基甲基，這些核苷酸被化學(xué)封閉，以防止聚合酶在每個循環(huán)中摻入一個以上的核苷酸。摻入核苷酸后，在不同通道中針對不同堿基測量熒光信號。一旦收集到熒光信號，就會開始一個新的循環(huán)，重復(fù)此動態(tài)過程，直到完成每個片段的測序為止。總之，NGS測序反應(yīng)分三個步驟進(jìn)行：核苷酸的添加，成像和通過熒光團(tuán)裂解的3'-OH再生。