5-Propargylamino-3'-azidomethyl-dCTP是制備用于下一代測序（NGS）的熒光綴合物的關鍵組成部分。 NGS使用與早期Sanger測序相似的鏈終止方法，但NGS是通過熒光標記的核苷酸類似物作為擴增反應的可逆終止劑來進行的。 NGS依賴于可逆的DNA聚合阻斷，而Sanger測序則使用ddNTP不可逆轉的DNA聚合阻斷。 NGS的另一個不同特征是通過橋式PCR進行體外克隆擴增以增加待測序分子的數量。在此平臺上，片段與固定在固體表面上的引物連接，進行原位擴增，生成具有相同分子的DNA簇。在每個循環中，同時添加可逆終止的四個核苷酸，并通過它們互補的聚合酶摻入。通過將3'-OH基團替換為3'-o-疊氮基甲基，這些核苷酸被化學封閉，以防止聚合酶在每個循環中摻入一個以上的核苷酸。摻入核苷酸后，在不同通道中針對不同堿基測量熒光信號。關于下一循環，洗滌未摻入的核苷酸，并用TCEP去除3'端的化學FS。一旦收集到熒光信號，就會開始一個新的循環，重復此動態過程，直到完成每個片段的測序為止。總之，NGS測序反應分三個步驟進行：核苷酸的添加，成像和通過熒光團裂解的3'-OH再生。百螢生物為您提供優質的5-Propargylamino-3'-azidomethyl-dCTP。