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當前位置:西安百螢生物科技有限公司>>trFluor™ 染料和試劑盒>>檢測試劑盒>> 22805Cell Meter 線粒體膜電位檢測試劑盒

Cell Meter 線粒體膜電位檢測試劑盒

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產品型號22805

品       牌AAT Bioquest

廠商性質代理商

所  在  地西安市

更新時間:2024-01-31 10:23:06瀏覽次數(shù):149次

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Cell Meter 線粒體膜電位檢測試劑盒 是一套用于檢測細胞功能的工具。可以使用多種參數(shù)。

我們的Cell Meter 線粒體膜電位檢測試劑盒 是一套用于檢測細胞功能的工具。可以使用多種參數(shù)。該特定試劑盒旨在通過測量線粒體膜電位(MMP)的丟失來檢測細胞凋亡。線粒體膜電位的凋亡與線粒體通透性過渡孔的開放相吻合,導致*釋放到細胞質中,進而觸發(fā)凋亡級聯(lián)反應中的其他下游事件。該熒光測定法使用我們專有的陽離子MitoLite Orange檢測細胞中線粒體膜電位的變化。在正常細胞中,當線粒體中積累了MitoLite Orange時,橙色熒光強度會增加。但是,在凋亡細胞中,MMP凋亡后,MitoLite Orange的熒光強度降低。可以對用MitoLite Orange染色的細胞進行熒光檢測。我們的Cell Meter 橙色線粒體膜電位測定試劑盒可通過優(yōu)化的測定方法提供所有必需成分。該試劑盒可用于篩選凋亡激活劑和抑制劑。而且該測定可以以方便的96孔和384孔熒光酶標儀進行檢測,而無需清洗步驟。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供的Cell Meter 線粒體膜電位檢測試劑盒

實驗方案

樣品實驗方案

簡要概述

  1. 準備細胞

  2. 添加測試化合物

  3. 添加MitoTell Orange工作溶液(100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板)

  4. 將板在5%CO2、37°C的培養(yǎng)箱中孵育15-30分鐘

  5. 添加測定緩沖液B(50 µL /孔/ 96孔板或12.5 µL /孔/ 384孔板)

  6. 檢測Ex / Em = 540/590 nm(截止= 570 nm)的熒光增加(底部讀取模式)


溶液配制

工作溶液配制

將50 µL的200X MitoTell 橙色(組分A)添加到10 mL的測定緩沖液A(組分B)中,并充分混合以制成MitoTell Orange工作溶液,避光。

實驗步驟

1.用測試化合物處理細胞一段時間,以誘導細胞凋亡,并建立平行對照實驗。

陰性對照:僅用載體處理細胞。

陽性對照:在37°C 5%CO2培養(yǎng)箱中,以5-50 µM的濃度用FCCP或CCCP處理細胞15至30分鐘。 注意:CCCP或FCCP可以與MitoTell Orange同時添加。 為了獲得結果,可能需要為每個單獨的細胞系滴定CCCP或FCCP。

2.取出細胞培養(yǎng)基。注意:在添加MitoTell Orange工作溶液之前,必須除去細胞培養(yǎng)基。

3.將100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板的MitoTell Orange工作溶液添加到細胞板中。

4.將板在5%CO2、37°C的培養(yǎng)箱中避光放置15-30分鐘。注意:適當?shù)姆跤龝r間取決于所用的單個細胞類型和細胞濃度。優(yōu)化每個實驗的孵育時間。

5.將50 µL /孔/ 96孔板或12.5 µL /孔/ 384孔板的測定緩沖液B(組分C)添加到細胞板中。注意:加載后請勿洗滌細胞。對于非貼壁細胞,建議在加入測定緩沖液B(組分C)后,以800 rpm離心細胞板2分鐘,然后制動。

6.在加入分析緩沖液B(成分C)10至30分鐘后,使用熒光酶標儀(底部讀取模式)在Ex/Em=640/680 nm(截止=665 nm)處檢測熒光強度,可以使用終點模式,也可以使用動力學模式。


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