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當前位置:西安百螢生物科技有限公司>>trFluor™ 染料和試劑盒>>檢測試劑盒>> 22803Cell Meter 線粒體膜電位近紅外檢測試劑盒

Cell Meter 線粒體膜電位近紅外檢測試劑盒

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號22803

品       牌AAT Bioquest

廠商性質代理商

所  在  地西安市

更新時間:2024-01-31 10:18:39瀏覽次數:131次

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Cell Meter 線粒體膜電位近紅外檢測試劑盒 是一套用于檢測細胞生存力的工具。有多種參數可用于檢測細胞活力。

我們的Cell Meter 線粒體膜電位近紅外檢測試劑盒 是一套用于檢測細胞生存力的工具。有多種參數可用于檢測細胞活力。該特定試劑盒旨在通過測量線粒體膜電位的喪失來監測細胞凋亡。線粒體膜電位的崩潰與線粒體通透性過渡孔的開放相吻合,導致*釋放到細胞質中,進而觸發凋亡級聯反應中的其他下游事件。我們的Cell Meter NIR線粒體膜電位檢測試劑盒為所有必需成分提供了優化的測定方法,可檢測線粒體膜電位喪失的細胞凋亡。該熒光測定法是基于我們專有的陽離子MitoLite NIR 染料對細胞中線粒體膜電位的檢測。在正常細胞中,MitoLite NIR 主要在線粒體中積累,但是在凋亡細胞中,MitoLite NIR 染色強度降低。用MitoLite NIR 染色的細胞可以在620-640 nm激發下在660-680 nm熒光下進行檢測。該試劑盒可用于篩選凋亡激活劑和抑制劑。該測定可以以方便的96孔和384孔熒光微量滴定板形式進行。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供的Cell Meter 線粒體膜電位近紅外檢測試劑盒

實驗方案

樣品實驗方案

簡要概述

  1. 準備細胞

  2. 添加測試化合物

  3. 添加MitoLite NIR工作溶液(100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板)

  4. 在5%CO2的培養箱中于37°C孵育30-60分鐘

  5. 添加測定緩沖液B(50 µL /孔/ 96孔板或12.5 µL /孔/ 384孔板)

  6. 檢測Ex / Em = 640/680 nm(截止= 665 nm)的熒光強度(底部讀取模式)


溶液配制

工作溶液配制

將50 µL的200X MitoLite NIR(組分A)添加到10 mL的測定緩沖液A(組分B)中,并充分混合以制成MitoLite NIR工作溶液,避光。


操作步驟

1.用測試化合物處理細胞一段所需的時間,以誘導細胞凋亡并建立平行對照實驗。

陰性對照:僅用載體處理細胞。

陽性對照:在37℃,5%CO2培養箱中,以5-50 µM的濃度用FCCP或CCCP處理細胞15至30分鐘。 注意:CCCP或FCCP可以與MitoLite NIR同時添加。 為了獲得結果,可能需要為每個單獨的細胞系滴定CCCP或FCCP。

2.在添加MitoLite NIR工作溶液之前,請去除細胞培養基。注意:在添加MitoLite NIR工作溶液之前,必須除去細胞培養基。

3.將100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板的MitoLite NIR工作溶液添加到細胞板中。

4.在37°C,5%CO2的培養箱中避光放置30-60分鐘。注意:適當的孵育時間取決于所用的單個細胞類型和細胞濃度。優化每個實驗的孵育時間。

5.在檢測熒光信號之前,將50 µL /孔/ 96孔板或12.5 µL /孔/ 384孔板的測定緩沖液B(組分C)加入細胞板。注意:加載后請勿洗滌細胞。對于非貼壁細胞,建議在加入測定緩沖液B(組分C)后,以800 rpm離心細胞板2分鐘,然后制動。

6.加入測定緩沖液B(組分)10到30分鐘后,使用熒光酶標儀(底部讀取模式)(Ex / Em = 640/680 nm(Cutoff = 665 nm))檢測熒光強度。



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