Amplite 比色法腸激酶活性檢測(cè)試劑盒是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的用于酶活性的試劑盒，腸激酶（也稱為腸肽酶）是由十二指腸壁中的細(xì)胞產(chǎn)生的絲*酸蛋白酶，并且是人和動(dòng)物消化系統(tǒng)中的關(guān)鍵酶。 腸激酶將胰*白酶原轉(zhuǎn)化為其活性形式的胰*白酶，導(dǎo)致隨后的胰腺消化酶的活化。 腸激酶的缺乏導(dǎo)致腸道消化障礙。 腸激酶的抑制可能通過(guò)抑制參與癌變和轉(zhuǎn)移的蛋白酶而具有抗腫瘤作用。 因此，高度選擇性和靈敏的腸激酶檢測(cè)在生物化學(xué)應(yīng)用中起著關(guān)鍵作用。 Amplite 比色腸激酶活性檢測(cè)試劑盒為定量腸激酶活性提供了一種靈敏的檢測(cè)方法。 在腸激酶切割后，腸激酶底物可以通過(guò)EK Yellow 在吸光度酶標(biāo)儀中在405nm處檢測(cè)。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的Amplite 比色法腸激酶活性檢測(cè)試劑盒。

適用儀器

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡(jiǎn)要概述

1.用稀釋的腸激酶標(biāo)準(zhǔn)品（50μL）制備測(cè)試樣品
2.加入等體積的腸激酶工作液（50μL）
3.在37°C孵育30-60分鐘
4.監(jiān)測(cè)OD增加到405nm

溶液制備

1.儲(chǔ)備溶液

所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。 避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1. EK Yellow 原液（100X）：
將50μLDMSO（組分E）加入EK Yellow （組分A）中以制備100X儲(chǔ)備溶液。

2.腸激酶底物儲(chǔ)備液（100X）：
將50μLDMSO（組分E）加入腸激酶底物（組分B）中以制備100X儲(chǔ)備溶液。

3.腸激酶標(biāo)準(zhǔn)溶液（10ug / mL）：
將50uL ddH2O + 0.1％BSA加入腸激酶標(biāo)準(zhǔn)小瓶（組分D）中以制備10μg/ mL腸激酶原液。

2.標(biāo)準(zhǔn)溶液

腸激酶標(biāo)準(zhǔn)
將10μL10μg/ mL腸激酶標(biāo)準(zhǔn)溶液加入990μL分析緩沖液（組分C）中，得到100ng / mL腸激酶溶液（EK7）。 然后在測(cè)定緩沖液中進(jìn)行1：2連續(xù)稀釋，以獲得連續(xù)稀釋的腸激酶標(biāo)準(zhǔn)品（EK6-EK1）。 注意：EK標(biāo)準(zhǔn)僅用于陽(yáng)性對(duì)照，不應(yīng)作為酶活性的定量標(biāo)準(zhǔn)。

3.工作溶液

將50μLEKYellow 儲(chǔ)備液和50μL腸激酶底物儲(chǔ)備液加入5 mL分析緩沖液（組分C）中; 混合均勻，制成腸激酶（EK）工作溶液（組分A + B + C）。 注意：對(duì)于一個(gè)96孔板，測(cè)定混合物就足夠了。 配制的工作溶液不穩(wěn)定，需快速使用。