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當前位置:西安百螢生物科技有限公司>>trFluor™ 染料和試劑盒>>檢測試劑盒>> 13812Amplite 熒光法L-乳酸脫氫酶LDH檢測試劑盒

Amplite 熒光法L-乳酸脫氫酶LDH檢測試劑盒

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產品型號13812

品       牌其他品牌

廠商性質代理商

所  在  地西安市

更新時間:2024-01-29 21:08:31瀏覽次數:139次

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Amplite 熒光法L-乳酸脫氫酶LDH檢測試劑盒是一種可催化丙酮酸和乳酸的相互轉換氧化還原酶。 LDH存在于各種各樣的生物體,包括動物和植物的細胞質中。細胞組織的損傷或紅細胞溶血后釋放的LDH進入血液。

Amplite 熒光法L-乳酸脫氫酶LDH檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于檢測乳酸的試劑he,乳酸脫氫酶(LDH )是一種可催化丙酮酸和乳酸的相互轉換氧化還原酶。 LDH存在于各種各樣的生物體,包括動物和植物的細胞質中。細胞組織的損傷或紅細胞溶血后釋放的LDH進入血液。因為LDH是相當穩定的酶,它已被廣泛地用于評價和組織細胞毒性的存在。乳酸脫氫酶的定量具有廣闊的應用范圍。 LDH可在某些病理條件下提高,如癌癥。這種Amplite 乳酸脫氫酶測定試劑he提供了用于生物樣品中L-乳酸脫氫酶( L- LDH)基于熒光檢測的方法,如血清,血漿,尿液,以及細胞培養物的樣品。熒光信號可以通過熒光酶標儀在激發/發射= 540 nm/590 nm處讀出。有了這個熒光Amplite L-乳酸脫氫酶測定,我們能夠探測到小至1 mU/mL的L-乳酸脫氫酶在100 μL的反應體積。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供的Amplite 熒光法L-乳酸脫氫酶LDH檢測試劑盒

實驗方案

96孔板測定示例

概述

制備D-乳酸測定混合物(50μL)

加入D-乳酸標準品或測試樣品(50μL)

在室溫下孵育30分鐘~2小時

監測吸光度比率在A575nm / A605nm處增加

注意:在開始實驗之前,在室溫下解凍每個試劑盒組分的一個小瓶。

 

操作方法

1.準備NAD儲備溶液(100X):

向NAD小瓶(組分C)中加入100μLH2O,制成100X NAD儲備溶液。

 

2.準備D-乳酸儲備液:

將200μLH2 O或1×PBS緩沖液加入到D-乳酸鹽標準品(組分D)的小瓶中以制備100mM D-乳酸鹽標準溶液。

注意:未使用的D-lacate標準儲備溶液應分成單次使用的等分試樣并儲存在-20℃。

 

3.準備D-乳酸標準品(0至1 mM)的連續稀釋液:

3.1將10μLD-乳酸儲備溶液(來自步驟2)加入990L 1x PBS緩沖液中以產生1mM D-乳酸鹽標準溶液。

注意:稀釋的D-乳酸標準溶液不穩定,應在4小時內使用。

3.2取200μL的1mM D-乳酸標準溶液進行1:3連續稀釋,得到300,100,30,10,3,1和0μM的D-乳酸標準品系列稀釋液。

3.3如說明書中的表1和2中所述,將含有D-乳酸鹽標準品和含D-乳酸鹽的測試樣品的系列稀釋液加入白色透明底96孔微量培養板中。

 

4.準備D-乳酸測定混合物:

4.1將5 mL測定緩沖液(組分B)加入一瓶酶混合物(組分A)中。

4.2將50μLNAD儲備液(100X,來自步驟1)加入組分A(來自步驟4.1)的瓶中,并且混合均勻。

注意:這種D-乳酸測定混合物足以用于一個96孔板。 未使用的D-乳酸測定混合物應分成單次使用的等分試樣并儲存在-20℃。

 

5.運行D-乳酸測定:

5.1將50μLD-乳酸測定混合物(來自步驟4.2)添加到D-乳酸標準品,空白對照和測試樣品(參見步驟3.3)的每個孔中,以使總D-乳酸測定體積為100μL/孔。

注意:對于384孔板,每孔加入25μL樣品和25μLD-乳酸測定混合物。

5.2在室溫下孵育反應30分鐘至2小時,避光。

5.3用A575nm / A605nm的吸光度讀板儀檢測吸光度比率的增加。



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