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Amplite 比色法D-乳酸檢測試劑盒

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具體成交價以合同協議為準

產品型號13811

品       牌其他品牌

廠商性質代理商

所  在  地西安市

更新時間:2024-01-29 21:06:05瀏覽次數:97次

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張經理

biolite
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Amplite 比色法D-乳酸檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于檢測乳酸的試劑盒,乳酸是手性的并且具有兩種光學異構體:L-乳酸和D-乳酸。


Amplite 比色法D-乳酸檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于檢測乳酸的試劑盒,乳酸是手性的并且具有兩種光學異構體:L-乳酸和D-乳酸。 在代謝和運動過程中,乳酸鹽通過乳酸脫氫酶(LDH)不斷從丙酮酸產生。 監測乳酸水平是評估組織需氧量和利用率之間平衡的好方法,在研究細胞和動物生理學時非常有用。 D-乳酸不被哺乳動物代謝,其從體內主要取決于腎臟排泄。 D-和L-乳酸存在于許多發酵乳制品中,例如酸奶和奶酪,以及腌制蔬菜,腌制肉類和魚類。 D-和L-乳酸含量是食品的質量指標,如雞蛋,牛奶,果汁和葡萄酒。 血液中異常高濃度的D-乳酸通常是胃腸道中過度生長的反映。

AAT Bioquest的試劑盒(L#乳酸檢測Cat#13814和13815,D-lactate檢測Cat#13810和13811)提供熒光和吸光度檢測方法,用于檢測L-乳酸鹽或D-乳酸鹽。 生物樣品,如血清,血漿,尿液,以及細胞培養樣品。 在酶偶聯測定中,乳酸與NADH成比例相關,其通過生色NADH傳感器特異性監測。 通過吸光度酶標儀在~575nm或~A605nm的吸光度比下可以容易地讀取信號,以提高測定靈敏度。 使用這種檢測試劑盒,我們能夠在100μL反應體積中檢測到低至4μM的D-乳酸。 它應用廣泛,可以很容易地適用于需要測量D-乳酸的各種應用。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供優質的Amplite 比色法D-乳酸檢測試劑盒.

實驗方案

96孔板測定示例

概述

制備D-乳酸測定混合物(50μL)

加入D-乳酸標準品或測試樣品(50μL)

在室溫下孵育30分鐘~2小時

監測吸光度比率在A575nm / A605nm處增加

注意:在開始實驗之前,在室溫下解凍每個試劑盒組分的一個小瓶。

操作方法

1.準備NAD儲備溶液(100X):

向NAD小瓶(組分C)中加入100μLH2O,制成100X NAD儲備溶液。

2.準備D-乳酸儲備液:

將200μLH2 O或1×PBS緩沖液加入到D-乳酸鹽標準品(組分D)的小瓶中以制備100mM D-乳酸鹽標準溶液。

注意:未使用的D-lacate標準儲備溶液應分成單次使用的等分試樣并儲存在-20℃。

3.準備D-乳酸標準品(0至1 mM)的連續稀釋液:

3.1將10μLD-乳酸儲備溶液(來自步驟2)加入990L 1x PBS緩沖液中以產生1mM D-乳酸鹽標準溶液。

注意:稀釋的D-乳酸標準溶液不穩定,應在4小時內使用。

3.2取200μL的1mM D-乳酸標準溶液進行1:3連續稀釋,得到300,100,30,10,3,1和0μM的D-乳酸標準品系列稀釋液。

3.3如說明書中的表1和2中所述,將含有D-乳酸鹽標準品和含D-乳酸鹽的測試樣品的系列稀釋液加入白色透明底96孔微量培養板中。

4.準備D-乳酸測定混合物:

4.1將5 mL測定緩沖液(組分B)加入一瓶酶混合物(組分A)中。

4.2將50μLNAD儲備液(100X,來自步驟1)加入組分A(來自步驟4.1)的瓶中,并且混合均勻。

注意:這種D-乳酸測定混合物足以用于一個96孔板。 未使用的D-乳酸測定混合物應分成單次使用的等分試樣并儲存在-20℃。

5.運行D-乳酸測定:

5.1將50μLD-乳酸測定混合物(來自步驟4.2)添加到D-乳酸標準品,空白對照和測試樣品(參見步驟3.3)的每個孔中,以使總D-乳酸測定體積為100μL/孔。

注意:對于384孔板,每孔加入25μL樣品和25μLD-乳酸測定混合物。

5.2在室溫下孵育反應30分鐘至2小時,避光。

5.3用A575nm / A605nm的吸光度讀板儀檢測吸光度比率的增加。





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