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南京沃博生物科技有限公司

Abmart抗體使用及保存說(shuō)明書(shū)

時(shí)間:2023-6-20閱讀:1625

1.打開(kāi)產(chǎn)品包裹

(1) 在打開(kāi)包裹之前先確定其是否完整,如果包裹的外包裝完好,請(qǐng)拍照記錄。然后檢查包裹內(nèi)部的物品是否也完整。

(2) 如果收到的抗體產(chǎn)品是液態(tài)的,請(qǐng)檢查該產(chǎn)品在接收時(shí)是否處于低溫環(huán)境(低于10度)。

(3) 抗體產(chǎn)品發(fā)貨時(shí),您會(huì)收到一封來(lái)自我們的發(fā)貨通知及裝箱單信息的郵件,您也可以通過(guò)登錄我們的客戶(hù)中心網(wǎng)站來(lái)找到裝箱單信息。請(qǐng)核對(duì)收到的抗體產(chǎn)品的管數(shù)、樣品名稱(chēng)、質(zhì)量、體積和濃度是否與裝箱單上的信息一致。

(4)標(biāo)簽詳解:

圖片

(5) 如您對(duì)以上步驟有所疑問(wèn),請(qǐng)聯(lián)系我們的客服人員

2. 腹水及抗體復(fù)溶

(1) 您可以根據(jù)需要將腹水及抗體干粉儲(chǔ)存于-20℃,直至使用時(shí)再取出。如果同一個(gè)樣品有多管,建議根據(jù)所需用量進(jìn)行再溶,然后將剩余的干粉儲(chǔ)存在-20℃。

(2) 腹水和抗體保存液成分如下表所示:

單抗腹水

0.05% Proclin 300,50% 甘油(液體)/10 mM PBS(凍干)

純化單抗

100mMganansuan , 1Mtris中和 , pH 7.4

多抗

100mMganansuan , 1Mtris中 和 , 0.05% Proclin 300, 50% 甘油 , pH7.4

(3) 進(jìn)行抗體復(fù)溶時(shí),請(qǐng)根據(jù)試管上標(biāo)注的質(zhì)量向管內(nèi)加入適量的Milli-Q water

(例如,對(duì)于0.2 mg的抗體,如果加入200 μL Milli-Q water溶解,即為濃度1 mg/ml的工作液。工作液儲(chǔ)存請(qǐng)參照說(shuō)明書(shū)第四部分,抗體稀釋請(qǐng)參照說(shuō)明書(shū)第五部分)。

加入Milli-Q water后,輕柔顛倒混勻。如果仍有部分抗體未溶解,可以將試管于4℃冰箱中靜置4個(gè)小時(shí),其間每小時(shí)輕柔混勻一次。

(4) 如果您的樣品經(jīng)過(guò)上述步驟未wanquan溶解,建議添加等量10 mM PBS pH 7.4溶液,然后將樣品于4℃冰箱中靜置4個(gè)小時(shí),其間每小時(shí)輕柔混勻一次。

(5) 對(duì)于部分可溶的樣品,您可以在4℃,10,000 rpm的條件下離心1 min。然后收集上清,采用我們?yōu)槟峁┑亩嚯倪M(jìn)行ELISA檢測(cè)該上清。

(6) 如果未檢測(cè)到上清液的活性,請(qǐng)聯(lián)系我們的客服人員

備注:如果您收到的腹水或者抗體為液態(tài)的,建議您根據(jù)每次實(shí)驗(yàn)需要的用量進(jìn)行小體積分裝,分裝后儲(chǔ)存到-20℃以便于短期使用。需要長(zhǎng)期使用時(shí),請(qǐng)參照本說(shuō)明書(shū)第四部分的建議來(lái)進(jìn)行儲(chǔ)存。

3. 多肽的復(fù)溶

(1) 您可以根據(jù)您的需要將多肽干粉先儲(chǔ)存于-20℃冰箱,直至使用時(shí)再取出。

(2) 向干粉中加入50 μL DMSO制成高濃度的儲(chǔ)備液。比如,1 mg的干粉可以形成濃度為20 mg/mL的儲(chǔ)備液。儲(chǔ)備液儲(chǔ)存于-20℃條件下。

(3) 每次實(shí)驗(yàn),取出足夠的儲(chǔ)備液,利用10 mM PBS pH7.4溶液將其稀釋成工作液(例如,4 mg/mL的工作濃度)。請(qǐng)盡量避免將稀釋后的樣品在4℃放置時(shí)間超過(guò)一周,以防造成抗體活性降低。

4. 儲(chǔ)存

請(qǐng)避免反復(fù)凍融對(duì)抗體產(chǎn)品造成的傷害,建議您將初次復(fù)溶后的抗體跟據(jù)使用量進(jìn)行小量分裝(可以等量分裝到小體積的EP管中,每次使用取出1管進(jìn)行稀釋即可),或者添加50%終濃度的甘油,并且儲(chǔ)存在-20℃冰箱。如您需要將復(fù)溶后的腹水在4℃條件下短期儲(chǔ)存,建議加入抗微生物試劑(azide or thimerosal),但不建議在4℃儲(chǔ)存較長(zhǎng)時(shí)間。

備注:多抗產(chǎn)品是一次性發(fā)貨,并且為含有終濃度50%甘油的液態(tài)抗體。

5. 抗體驗(yàn)證

(1) 稀釋建議:抗體使用的最適濃度或者最適稀釋比例請(qǐng)您根據(jù)實(shí)驗(yàn)類(lèi)型調(diào)整。

我們推薦的稀釋濃度為:WB: 1:200-1:1000 IP: 1:200 IF/IHC: 1:400

(2) 在用于其他實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證之前,我們推薦您先采用Western BlotWB)實(shí)驗(yàn)方法來(lái)進(jìn)行抗體的檢測(cè)。WB結(jié)果是抗體特異性驗(yàn)證的必須部分。詳細(xì)的抗體驗(yàn)證方法您可以通過(guò)我們的客戶(hù)中心網(wǎng)站獲得。


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