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血清實(shí)際從外觀和性能上篩選介紹

2023-3-6  閱讀(501)

在實(shí)際篩選時(shí),主要從血清外觀和實(shí)驗(yàn)操作時(shí)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)進(jìn)行。
從外觀上:
1. 顏色:
根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度。胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血,因?yàn)樘ヅQ迥δ懿睿t細(xì)胞容易破裂;

2. 澄清度:
高質(zhì)量的胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡;

3. 血清沉淀:
血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對(duì)血清質(zhì)量沒有影響,沉淀的產(chǎn)生原因跟加工生產(chǎn)方式、是否反復(fù)凍融密切相關(guān),在實(shí)驗(yàn)操作中可能會(huì)對(duì)細(xì)胞觀察產(chǎn)生影響。

從性能上:
1. 細(xì)胞形態(tài),在進(jìn)行血清篩選時(shí)首先觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)形態(tài)是否產(chǎn)生明顯變化,以及觀察貼壁細(xì)胞的貼壁情況,細(xì)胞在不同血清培養(yǎng)中可能會(huì)出現(xiàn)形態(tài)上的差異;
2. 倍增時(shí)間,一般情況下會(huì)選擇倍增時(shí)間短的血清,值得注意的是血清的影響會(huì)傳至5代,在進(jìn)行測(cè)試時(shí),最好培養(yǎng)五代后進(jìn)行計(jì)倍增時(shí)間的計(jì)算;
3. 克隆形成率,測(cè)試時(shí)一般選50100200個(gè)細(xì)胞進(jìn)行平板克隆測(cè)試,平均5d左右換一次液,兩周后染色計(jì)數(shù),對(duì)比克隆形成情況。
血清的質(zhì)量,種類及使用的濃度都有可能影響細(xì)胞的生長(zhǎng),而不同批次的血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)的能力也不同,尤其是對(duì)克隆細(xì)胞的生長(zhǎng),某些批次血清可能含有毒性或抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的物質(zhì)。因此,在購(gòu)買大量血清之前,必須對(duì)血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)能力進(jìn)行檢測(cè),然后再大量購(gòu)買質(zhì)量好的同一批號(hào)的血清。



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