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酶標板與蛋白和其它分子結合不同分類

2023-2-27  閱讀(520)

根據酶標板與蛋白和其它分子結合才干的不同,又分為高結合力、中結合力和氨基化等。

1、高結合力

此種酶標板,表面經處理后,其蛋白結合才干大大增強,可達300~400ng IgG/cm2,首要結合的蛋白分子量>10kD。運用該類酶標板可進步敏感性,并可相對減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易發生非特異性反應。抗原或抗體包被后,以非離子去污劑無法有效地封閉未結合蛋白的部位,需運用蛋白作為封閉劑。

2、中結合力

此類酶標板經表面疏水鍵與蛋白結合,適宜作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結合才干為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,可下降潛在的非特異性穿插反應。該類板可以慵懶蛋白或非離子去污劑作為封閉液。

ELISA試劑盒實驗

3、氨基化

ELISA試劑盒這種酶標板經表面改性處理后具有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由親水鍵代替。該類酶標板適宜作為小分子蛋白的固相載體。運用適宜的緩沖液和pH值,其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯劑共價結合的才干,可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于下降了疏水性,一部分蛋白分子無法結合;此外,其表面需有效地封閉。由于親水和共價的表面特性,運用的封閉液有必要可以與非反應性氨基基團和所挑選的交聯劑中任何功用基團發生作用。




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