細(xì)胞：F9細(xì)胞
中文名稱：小鼠畸胎瘤細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
F9細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；)
Nature干細(xì)胞開關(guān)——p53基因
干細(xì)胞的一個明確定義是它們在保持分化成多種類型細(xì)胞的能力的同時，也能長時期地通過細(xì)胞的分裂自我更新。
在老鼠的胚胎干細(xì)胞中，(通派細(xì)胞庫供應(yīng)：293T細(xì)胞)在腫瘤抑制中起關(guān)鍵作用的p53基因也能關(guān)閉細(xì)胞的自我更新功能，并啟動干細(xì)胞的分化功能。
考慮到p53識別中毒和DNA損害的功能，(通派細(xì)胞庫供應(yīng)：S-180細(xì)胞)研究人員推測：p53也許會通過誘導(dǎo)干細(xì)胞的分化和有缺陷的干細(xì)胞的死亡來保護(hù)干細(xì)胞的遺傳穩(wěn)定性。
p53通過調(diào)節(jié)基因的表達(dá)來間接發(fā)揮它的許多作用。發(fā)現(xiàn)p53關(guān)閉了胚胎干細(xì)胞自我更新所必需的基因Nanog。
Nanog的缺失導(dǎo)致了胚胎干細(xì)胞的分化。(通派細(xì)胞庫供應(yīng)：GH3細(xì)胞)Nanog被認(rèn)為在調(diào)節(jié)干細(xì)胞的增生中發(fā)揮了重要作用，但是目前還不清楚在這一點上p53對它的調(diào)節(jié)是否對早期發(fā)育也很重要。
人類胚胎干細(xì)胞的治療潛力讓科學(xué)家們對調(diào)節(jié)細(xì)胞自我更新的分子機理產(chǎn)生了興趣，這些發(fā)現(xiàn)是在其中發(fā)揮重要作用的關(guān)鍵一環(huán)。
