細胞:D407細胞
中文名稱:人視網膜色素上皮細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:1640 培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
D407細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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Nature干細胞殺手
只要有一個外來細胞出現在人類胚胎干細胞(HESCs)中,就足以導致胚胎干細胞在移植時被宿主的免疫系統殺。
HESCs具有發育成各類細胞的潛力,(通派細胞庫供應:T-47D細胞)因此它們是組織移植的候選者。
HESCs主要是在源自動物的“血清置換液”中培養,(通派細胞庫供應:SHG44細胞)這種培養液也是硅鋁酸分子Neu5Gc的來源,但許多人類的循環抗體都會對付Neu5Gc分子。
HESCs在標準培養液中會混合相當數量的Neu5Gc。(通派細胞庫供應:Jurkat細胞)這些細胞被置入人的血清中,會導致Neu5Gc抗體的出現,最終在活機體內殺死HESCs。
研究人員因此認為,如果要全部清除Neu5Gc,(通派細胞庫供應:LLC細胞)就需要用人的血清培養液代替動物的“血清置換液”,這樣HESCs的培養過程就不會接觸任何動物產品。