細胞:Daoy細胞
中文名稱:人髓母細胞瘤細胞
生長特性:貼壁細胞
Daoy細胞培養基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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GBM是原發性腦腫瘤中最常見且致死率高的惡性腫瘤。
膠質瘤干細胞(GSC)是存在于GBM中的一種具有強致瘤性的細胞類群,通常認為GSC介導了GBM的細胞異質性、耐藥性和預后不良。
抑癌基因PTEN的功能失活是GBM中最常見的遺傳改變之一,靶向敲除PTEN基因選擇性誘發人神經干細胞發生致瘤性轉化,而間充質干細胞則表現為加速衰老。
PTEN缺失的神經干細胞表現出腫瘤相關的代謝和基因表達譜改變,且獲得了在免疫缺陷小鼠顱內形成腫瘤的能力。另一個抑癌基因p53的缺乏可明顯增強PTEN缺失的神經干細胞的致瘤性。
研究還發現,PAX7與PTEN的表達水平在膠質瘤臨床大數據庫中呈現負相關性,進一步確定了PTEN-PAX7通路在神經膠質母細胞瘤發病過程中的關鍵作用。
臨床試驗發現,霉素C能夠選擇性誘導PTEN缺失的神經干細胞發生凋亡,揭示了未來用于PTEN突變型神經膠質母細胞瘤精準治療的一種可能方案。
發現了PTEN保護人神經干細胞的一種新機制,并建立了新型的人類神經干細胞研究平臺,以便系統精確地分析各類促使人神經干細胞發生惡性轉化的因素。該研究有望為神經膠質母細胞瘤的精準治療提供新靶點和思路。