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  • ELISA標準操作及技術服務的常見問題分析

    一.ELISA標準操作要點優質的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應為新鮮的和高質量的本公司要求使用的純化水電導率小于1.5μs/cm。1.標本的采取和保存大部分ELISA檢測均以血清為標本。血清標本可按常規方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP為標記的ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,
  • ELISA檢測血清的詳細留意事項

    大部分elisa檢測均以血清為標本。血清標本可按慣例方法收集,應留意防止溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP為符號的ELISA測定中,溶血標本可能會添加非特異性顯色。血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會發生假陽性反應。一般說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃。超越一周測定的需-20℃保存。凍住血清融解后,蛋白質局部濃縮,散布不均,應充沛混勻并防止發生氣泡。混濁或有沉積的血清標本應先離心或過濾,弄清后再檢測。重復凍融會使抗體效價下跌,所
  • 人生存素(survivin)ELISA試劑盒使用說明書

    本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T10ng/L-260ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中生存素(survivin)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人生存素(survivin)水平。用純化的人生存素(survivin)體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入生存素(survivin),再與HRP標記的生存素(survivin)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色
  • 想要的ELISA實驗結果為什么不一致?

    絕大多數ELISA試劑盒實驗人員頭疼的問題,莫過于試驗成果不抱負。其實做科研試驗,就是這樣在不斷探究中尋求真理。很難有人可以的試驗成功。可是,我在做試驗過程中可以盡量防止哪些常犯的過錯呢?jin天讓我們一同來看一下,影響ELISA試驗成果不抱負的原因有哪些?操作應對試驗的物理參數有充沛的了解,如環境溫度(保持在18c~25℃)、反響孵育溫度和孵育時刻、洗刷的次數等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。2.正確運用加樣器加樣器應筆直參加標本或試劑,ELISA試劑盒防止刮擦包被板底部。加樣過程中防止液
  • ELISA實驗操作秘籍

    如何利用ELISA篩選以及ELISA方法操作的注意事項有哪些呢?相信很多做實驗的小伙伴都有這樣的疑問,今天小編就給大家總結一下,注意聽講哦!ELISA,全稱酶聯免疫吸附實驗,主要利用的是抗原抗體特異性結合的特點,可分為直接法、間接法、雙抗體夾心法、競爭法等。下面以間接法為例進行介紹:1、方陣ELISA。用途:①融合前后確定鼠血清中抗體效價;②拿到單抗腹水后,需要建立ELISA方法時首先要確定包被原及抗體的優質工作濃度。經典的方陣ELISA:將抗原和抗體各自稀釋成不同梯度濃度,結果OD值P/N2的
  • 人葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD) ELISA試劑盒使用說明書

    本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T10ng/L-360ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)水平。用純化的人葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD),再與HRP標記的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過CHE底洗滌后加底物TM
  • 手工洗板與自動洗板之差異

    在Elisa酶聯免疫試劑盒試驗中,洗板是非常重要的過程。酶聯免疫試驗(ELISA)洗滌過程雖不是一個反應過程,但卻也決定著實驗的成敗?。ELISA就是通過洗滌來達到分離游離和結合的酶標記物的目的,通過洗滌以清除殘留在微孔板中未能與固相抗原或抗體相結合的物質,以及在反應過程中的非特異性吸附于固相載體上的干擾物質。聚苯乙烯對蛋白質的吸附是普遍的,在ELISA測定的反應過程中應盡量避免非特異性吸附,洗滌時又應將這些非特異性吸附的干擾物質洗滌掉。由于“ELISA檢測試劑盒”具有的特異性,抗原抗體的結合發
  • ELISA實驗要點:洗滌是關鍵

    優化ELISA的重點之一在于洗滌。洗滌步驟可降低未結合抗體所引起的背景信號,從而增加分析的信噪比。每一步之間的洗滌確保只有特異的結合事件被保留,在最后一步產生信號。而不充分的洗滌會導致差異和高背景,從而帶來不理想的結果。本文將為你介紹一些利用自動洗板機來洗滌ELISA平板的技巧。免疫分析,比如ELISA,一般包含兩個或以上的孵育步驟,中間以洗滌隔開。ELISA通常在96孔板中開展,其上包被了結合抗原或抗體。在封閉步驟后,包被后的平板首先與一抗或抗原孵育。隨后通過一些洗滌步驟去除未結合(低親和力)
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