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斐林試劑:成分:0.1g/mlNaOH(甲液)和0.05g/mlCuSO4(乙液).用法:將斐林試劑甲液和乙液等體積混合,再將混合后的斐林試劑倒入待測(cè)液,水浴加熱或直接加熱,如待測(cè)液中存在還原糖,則呈磚紅色.班氏糖定性試劑:為藍(lán)色溶液.和葡萄糖混合后沸水浴會(huì)出現(xiàn)磚紅色沉淀.用于尿糖的測(cè)定.雙縮脲試劑:成分:0.1g/mlNaOH(甲液)和0.01g/mlCuSO4(乙液).用法:向待測(cè)液中先加入2ml甲液,搖勻,再向其中加入3~4滴乙液,搖勻.如待測(cè)中存在蛋白質(zhì),則呈現(xiàn)紫色.蘇丹Ⅲ:用法:取蘇丹
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ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:①標(biāo)本因素;②試劑因素;③操作因素。下面就一些常見(jiàn)ELISA操作過(guò)程中的問(wèn)題一一分析。1.樣品稀釋酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng),如果血清不稀釋,不可避免會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng),出現(xiàn)假陽(yáng)性。因此,國(guó)外檢測(cè)血清抗體的試劑盒,均規(guī)定將血清稀釋至適當(dāng)?shù)谋稊?shù),以降低非特異性反應(yīng),使特異性的抗原抗體反應(yīng)
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酶標(biāo)記物包括酶標(biāo)記抗原、酶標(biāo)記抗體和酶標(biāo)記SPA等。酶標(biāo)記物質(zhì)量的好壞直接關(guān)系到免疫酶技術(shù)的成功與否,因此被稱為關(guān)鍵的試劑。酶標(biāo)記物中zui常用的是酶標(biāo)記抗體,它是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成。酶標(biāo)記抗體的質(zhì)量主要取決于純度好、活性強(qiáng)及親和力高的酶和抗體,其次要有良好的制備方法。目前,高質(zhì)量的酶(如辣根過(guò)氧化物酶,簡(jiǎn)稱HRP)國(guó)內(nèi)已有商品供應(yīng)。高質(zhì)量的抗體則可通過(guò)提取純化而獲得。在制備方法上,宜選用產(chǎn)率高、不影響結(jié)合物的活性和不混雜干擾性物質(zhì)且操作簡(jiǎn)便易行的方法。一、工作濃度的選擇在免疫酶
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ELISA實(shí)驗(yàn)質(zhì)量控制問(wèn)題
1.1基本概念1.1.1質(zhì)量控制(QuailityControl,Q.C)質(zhì)量控制是監(jiān)視全過(guò)程,排除誤差,防止變化,維持標(biāo)準(zhǔn)化現(xiàn)狀的一個(gè)管理過(guò)程。這一過(guò)程是通過(guò)一個(gè)反饋環(huán)路進(jìn)行的。1)確定控制的對(duì)象;2)規(guī)定控制對(duì)象的標(biāo)準(zhǔn)(預(yù)期值);3)制定或選擇控制方法和手段;3)測(cè)量實(shí)際數(shù)據(jù);4)比較或較對(duì)實(shí)際數(shù)據(jù)與預(yù)期值之間的差異,并說(shuō)明產(chǎn)生這一差異的原因。超出預(yù)定誤差范圍,報(bào)警系發(fā)出信號(hào),反饋通道中斷。5)采取行動(dòng),解決差異。恢復(fù)原狀(原標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài))的手段發(fā)揮作用。質(zhì)量控制主要采用質(zhì)控圖進(jìn)行。質(zhì)控圖是把某 -
小鼠二酰基甘油(DAGDG)ELISA試劑盒說(shuō)明書
小鼠二酰基甘油(DAG/DG)ELISA試劑盒說(shuō)明書預(yù)期應(yīng)用ELISA法定量測(cè)定小鼠血清、血漿、組織勻漿或其它相關(guān)生物液體中DAG含量。實(shí)驗(yàn)原理用純化的DAG抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的DAG抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的DAG呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(值),計(jì)算樣品濃度。試劑盒組成及試劑配制1、酶標(biāo)板:一塊( -
SYSTEMS®中文說(shuō)明書UNIONHONEST酶聯(lián)免疫吸附測(cè)試EnzymelinkedlmmunosorbentAssay_____________________________________________________________________________________雞(Chicken)干擾素-y(IFN-y)ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用試驗(yàn)原理:IFN-Y試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知IFN-Y濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)
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SYSTEMS®中文說(shuō)明書UNIONHONEST酶聯(lián)免疫吸附測(cè)試EnzymelinkedlmmunosorbentAssay_____________________________________________________________________________________人(Human)脫氧吡啶酚(DPD)ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗(yàn)原理:DPD試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知DPD濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)
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SYSTEMS®中文說(shuō)明書UNIONHONEST酶聯(lián)免疫吸附測(cè)試EnzymelinkedlmmunosorbentAssay_____________________________________________________________________________________兔(Rabbit)神經(jīng)肽Y(NPY)ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用試驗(yàn)原理:NPY試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知NPY濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先