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體外定向進化技術:DNA改組

2009-12-31  閱讀(3309)

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     DNA改組(DNA shuffling)是目前zui方便、有效的一種分子水平的體外定向進化技術,該技術同傾向錯誤PCR (Error-prone PCR) 相結合,通過對單基因或相關基因家族的靶序列進行多輪隨機誘變、重組和高通量的篩選,可以有效富集正突變,去除負突變,提高突變文庫的豐度,創造新基因和獲得期望功能的蛋白質。來自湖南師范大學生命科學學院微生物分子生物學湖南省重點實驗室的研究人員對這一重要技術進行了總結和展望,并提出了DNA改組的創新,發展和改組過程中應當注意的問題。

    DNA改組由由美國的Stemmer于1994年首先提出,經后人的不斷創新和改進,現已發展成為比較完善的技術體系。作為一種高通量的突變和篩選技術,不僅可以實現基因序列的點突變,還可以實現其它突變技術不能實現的基因片段插入、缺失、倒轉和整合等,而且可以反復改組,實現突變的優勢積累效應。

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