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一、ELISA試劑盒論洗刷的重要性
1. ELISAzui終一次洗刷一定要*！這一進(jìn)程不是是反響聚，但卻是決議試驗勝敗的要害！在ELISA測定的反響進(jìn)程中應(yīng)盡量避免非特異性吸附，應(yīng)把這種非特異性吸附的攪擾物質(zhì)洗刷下來。洗刷如不*，特別在zui終一次，如有酶物的非特異性吸附，將使空白值增加。別的，在間接法中如血清標(biāo)本內(nèi)的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈，也將與酶標(biāo)抗體效果而發(fā)生攪擾。
2 洗刷參數(shù)
洗刷量：主動洗板機(jī)會分配洗刷液。如果您之前遭受過高布景，那么不要猶疑，將洗刷量調(diào)為高，是比包被體積更高。太少的洗刷液會讓一部分剖析外表洗刷不到，從而明顯增加布景。一切反響孔的洗刷量有必要相同。ELISA試劑盒的制造商通常會在試劑盒的運用手冊中列出包被量。行業(yè)中通常運用的包被量是200 μl。
如果您你的試劑盒也是這么，那么制造商可能會主張運用300 μl洗刷液進(jìn)行洗刷，以便清潔全部反響孔的壁。通常來說，洗刷量越高，則孵育過程殘留的抗體或抗原量就越少。
3. 清洗液
通常選用0.01Mol/L pH 7.2 PBS吐溫緩沖液。吐溫是聚氧乙烯去水*脂肪酸酯，為非離子型的外表張力物質(zhì)，常做助溶劑。吐溫的編號依聚合*所的脂肪酸品種不一樣而定。吐溫20是月桂酸、吐溫40是棕櫚酸、吐溫60是硬脂酸，吐溫80是油酸等。通常用吐溫20參加緩沖液內(nèi)做為濕潤劑，ELISA試劑盒以削減非特異性吸附。也可在PBS緩沖液中參加1%牛血清白蛋白(或10%小牛血清或卵清蛋白)，特別在抗原包被今后，以牛血清白蛋白緩沖液再包被一次，而占有孔內(nèi)剩余位置，這么來削減非特異性反響。
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