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上海酶聯生物研究所

與您細談ELISA試劑盒抽吸的操作技巧方法

時間:2017-3-6閱讀:135
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ELISA試劑盒實驗中,洗刷是關鍵過程之一。而有一些參數會影響洗刷過程的作用,這些參數包括吸液高度和吸入方位,這兩者都能調整,以下降布景(殘留量)和差異。今日試劑盒與您細談ELISA抽吸的操作竅門 :
殘留液體中包括未的抗原或抗體,它們會添加布景信號。殘留量越小,殘留液體越少,轉移到下一步的干擾液體也就越少。吸液高度會顯著影響殘留量;假如洗刷吸頭與反響孔底部的距離稍大,那就會讓殘留量急劇添加。反之,假如洗刷吸頭壓著反響孔底部,那么也會使吸液效率下降,殘留量添加。
目前的洗板機通常運用兩種類型的洗頭:剛性和起浮的。起浮洗頭中的吸頭可在洗刷過程中自在上下移動,而剛性洗頭則固定在恰當的方位。運用剛性洗頭的洗刷操作在優化起來更為雜亂,由于你需求十分細心地調整吸液高度。假如你們試驗室運用幾種不一樣的板,那可能會很耗時。在運用起浮洗頭時,吸頭會降到反響孔的底部。調整高度就不是很主要,因而洗頭會下降到底部。
抽吸的方位也對殘留量有著主要影響;假如每個孔只運用一個抽吸點(這很多見,由于更快),那么抽吸的方位需求優化。的方位取決于洗頭的性狀,但它幾乎不在反響孔的中心,即使這是一切洗頭zui多見的默許方位。通常來說,方位在孔中心與孔壁之間的某處。
操作方法總結:
各種類型ELISA測定時一般需經過這些步驟:固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結果。
A、重復某一樣品時,加樣時間盡可能與*次接近。
B、加樣后在混勻器上充分混勻。
ELISA結果表示:
1、定性測定。
2、半定量測定,結果一般以滴度表示。
3、定量測定,即用已知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定,繪制標準曲線,結果以量或單位表示,在ELISA定量檢測中每一塊反應板都必須繪制相應的標準曲線。
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