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上海酶聯生物研究所

ELISA實驗中,成果取決于細節

時間:2018-7-10閱讀:230
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試驗科研者們往往對成果zui為重視,而因而疏忽了細節問題,但成果取決于細節!做試驗,上海酶聯生物教您掌握ELISA試劑盒細節(供參閱,了解更多可在本公司中留言)。
◆依據采用的載體分為:
1.疏水性聚脂布作為載體;
2.聚苯乙烯微量板為載體;
3.硝酸纖維膜為載體。
ELISA是將酶催化的擴大效果與特異性抗原抗體反響結合起來的一種微量分析技術。酶符號抗原或抗體今后,既不影響抗原抗體反響的特異性,也不改動酶自身的活性。由于ELISA試劑盒價格低廉且準確性搞、反響時間短等優點,所以合適大批量的檢測,一般常常用于食品安全檢測方面。
◆ELISA需求遵從的幾個細節關鍵:
1.抗原或抗體能吸附于固相載體外表,并堅持其免疫學活性;
2.抗原或抗體可通過共價鍵與酶銜接構成酶結合物,而此種酶結合物仍能堅持其免疫學和酶學活性;
3.酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可依據加入底物的色彩反響來斷定是否有免疫反響的存在,并且色彩反響的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,可依據已知濃度的抗原或抗體的色彩反響的深淺制作規范曲線并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。
◆注意事項:
1、標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會發作假陽性反響。保存過久可發作聚合在ELISA中可使本底加深。
2、凍住標本溶解后,蛋白質部分濃縮,散布不均,應充沛混勻宜輕緩,防止氣泡,可上下顛混合,不要在混勻器上激烈震蕩。
3、污濁或有沉積的標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。
4、反復凍融會使蛋白效價降低,所以代測樣本如需保存作屢次檢測,宜少數分裝冰存。

 

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