一組研究人員與美國加州大學一道利用結晶技術了解了CRISPR/ Cas9基因進行剪接的過程。在發表在科學(Science)雜志上的論文中,他們介紹了該技術過程中已知稱為R-loops的三鏈結構的形成方式,以及他們如何使用掌握的技術來捕獲此過程的三維圖像,還有他們所得到的結果。
在過去的三年中,CRISPR/ Cas9基因剪接和編輯工具已被用于各種實驗,以更好地了解基因是如何工作的,并有可能對其進行編輯來治愈遺傳性疾病。zui近新聞再次報道兩個團隊都聲稱是該技術的*,美國和商標局已經同意推進干擾聽證會,以對案件做出裁決。其中由Jennifer Doudna帶領的團隊,現在已經更加明確R-loop的形成方式是此技術手段的一部分。
CRISPR / Cas9技術,顧名思義,是基于Cas9蛋白質和其會導致R-loop的形成,但到現在為止,沒有人見過它實際上是怎樣工作的。在這個新的研究中,研究人員使用了一個此前被用于研究蛋白質的技術——其中所研究的蛋白質被形成結晶體,然后暴露于X射線下——所形成衍射圖案為研究其結構提供了線索。在這種情況下,該技術在Cas蛋白正在編輯DNA序列時被研究人員用來捕捉其三維圖像——這些圖像表明,蛋白質和DNA鏈之間的相互作用會導致DNA鏈彎曲一個30°角,這會使DNA和RNA鏈移動到一個位置,在此會形成一個R-loop。
在基因剪接的過程中了解R-loop是如何以及為何形成,對于提高該技術是非常關鍵的——可能會犯一些錯誤,如認錯和切錯DNA鏈。但它也可能有助于在不同情況下確定其它或被用于同樣目的的蛋白質。
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