植物赤霉素（GA）ELISA 檢測試劑盒使用說明書

【資料簡介】

植物赤霉素（GA）ELISA 檢測試劑盒試驗原理：

GA 試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知GA 濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將GA 和標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中GA 的濃度呈比例關系。

安全性

． 此試劑盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV為陰性，但沒有實驗室可*保證此血制品不會傳染肝炎、AIDS或其它傳染病，依據當地的安全條例處理本試劑盒里的成份及血清和血漿等樣品。

2． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

3． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

4． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

植物赤霉素（GA）ELISA 檢測試劑盒操作注意事項

． 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

2． 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。

3． 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6． 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

7． 底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

8． 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

9． 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

試劑的準備

． 標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：

40 nmol/L

（6號標準品）

原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。

20 nmol/L

（5號標準品）

00ul的原倍標準品加入00ul的標準品稀釋液

0 nmol/L

（4號標準品）

00ul的5號標準品加入00ul的標準品稀釋液

5.0 nmol/L

（3號標準品）

00ul的4號標準品加入00ul的標準品稀釋液

2.5 nmol/L

（2號標準品）

00ul的3號標準品加入00ul的標準品稀釋液

.25 nmol/L

（號標準品）

00ul的2號標準品加入00ul的標準品稀釋液

0 nmol/L

（空白對照）

原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

2． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

植物赤霉素（GA）ELISA 檢測試劑盒操作步驟

． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。

2． 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。

3． 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育小時。

4． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作四次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作四次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育5分鐘。避免光照。

8． 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。