葡萄糖氧化酶（glucose oxidase，GOD）試劑盒

【資料簡(jiǎn)介】

葡萄糖氧化酶（glucose oxidase，GOD）試劑盒說(shuō)明書 
分光光度法  50 管/48 樣 
正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定 
測(cè)定意義 
GOD （EC 1.1.3.4）廣泛存在于動(dòng)物、 和植物中， 催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并產(chǎn)生H2O2，
是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。 
測(cè)定原理 
GOD催化產(chǎn)生H2O2，過(guò)氧化物酶在有氧存在時(shí)催化H2O2分解產(chǎn)生的氧又將鄰聯(lián)茴香胺氧
化生成有色物質(zhì)，顏色深淺與葡萄糖氧化酶活性成線性關(guān)系。 
試驗(yàn)中所需的儀器和設(shè)備 
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸
餾水 
試劑的組成和配制 
提取液：液體60mL×1 瓶，4℃保存； 
試劑一：液體 40 mL×1 瓶，4℃保存； 
試劑二：液體 8 mL×1 瓶，4℃保存； 
試劑三：液體 2 mL×1 支，4℃保存； 
樣品測(cè)定的準(zhǔn)備   
組織處理：按照組織質(zhì)量（g） ：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g組織，
加入 1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。 
血清（漿）：直接檢測(cè)。 
測(cè)定步驟 
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 500nm，蒸餾水調(diào)零。 
2、 GOD 檢測(cè)工作液的配制：用時(shí)將試劑二和試劑三轉(zhuǎn)移至試劑一中，充分混勻，待用；
用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。 
3、測(cè)定前將GOD 檢測(cè)工作液在37℃（哺乳動(dòng)物）或25℃（其它物種）水浴 10min以上。 
4、在 1mL玻璃比色皿中加入 40μL樣本和 960μL工作液，立即混勻并計(jì)時(shí)，記錄 500nm下
20s吸光值 A1和 1min20s后的吸光值 A2。計(jì)算 ΔA＝A2-A1。 
GOD活力單位的計(jì)算 
1、血清（漿）GOD 活力的計(jì)算 
單位定義：每 mL血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol 氧化型鄰聯(lián)茴香胺為一個(gè)酶活力單位。  
GOD（nmol/min/mL）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109
]÷V樣÷T=3333×ΔA 
2、動(dòng)物組織GOD 活力的計(jì)算 
（1）按蛋白濃度計(jì)算 
單位定義：每 mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol 氧化型鄰聯(lián)茴香胺為一個(gè)酶活力單位。 
GOD（nmol/min/mg prot）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109
]÷(V樣×Cpr)÷T=3333×ΔA÷Cpr 
（2）按樣本鮮重計(jì)算 
葡萄糖氧化酶（glucose oxidase，GOD）試劑盒單位定義：每 g組織每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol 氧化型鄰聯(lián)茴香胺為一個(gè)酶活力單位。 
GOD（nmol/min/ g 鮮重）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109
]÷（W ×V樣÷V樣總）÷T=3333×ΔA÷W 
V反總：反應(yīng)體系總體積， 1×10-3
 L； ε： 氧化型鄰聯(lián)茴香胺摩爾消光系數(shù)， 7.5×103
 L / mol /cm；
d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.04 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；
T：反應(yīng)時(shí)間，1 min；  Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。 

葡萄糖氧化酶（glucose oxidase，GOD）試劑盒齊一生物現(xiàn)貨供應(yīng)