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魚(Fish)多巴胺(DA)ELISA 檢測試劑盒使用說明書
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- 【資料簡介】
魚(Fish)多巴胺(DA)ELISA 檢測試劑盒使用說明書
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA) 。往預先包被多巴胺(DA)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體, 經過溫育并*洗滌。 用底物TMB顯色, TMB
在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的多巴胺(DA)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值) ,計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心 30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量理鹽水搗碎。3000 轉離心 10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標儀(450nm)
2. 高精度加樣器 及 槍頭:0.5-10uL 、2-20uL 、20-200uL 、
200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項
1. 試劑盒保存在 2-8℃,使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F象,水浴加熱使結晶*溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中, 密封 (低溫干燥) 保存。
3. 濃度為 0 的 S0 號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋 5 倍,zui終結果乘以 5 才是樣本實際濃度。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。詳細說明書見附件!
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