人糖抗原72-4（CA72-4）ELISA試劑盒酶法

【資料簡介】

人糖抗原72-4(CA72-4)ELISA試劑盒酶法齊一生物客戶寄標本時需注明以下情況：

1、標本編號；2、所測項目；3、是否做復孔；3、；4、實驗后標本是否寄回。

客戶必知：

客戶應對所提供的材料及信息負責，如因客戶提供的材料及信息不準確而引起的實驗延誤或經濟損失由客戶承擔。

齊一生物供應ELISA試劑盒檢測的目的是為實驗提供準確可靠的定量分析實驗依據。為了保證實驗數據的可靠性，在實驗過程中必須堅持全面質量控制和全過程質量控制。在收集標本前都必須有一個完整的計劃。 

樣本保存條件：

1.2-8℃冰箱zui多放2周

2.-20到-50℃的冰箱可以放3-6個月

3.-50℃以下的冰箱，可以放一年

人糖抗原72-4(CA72-4)ELISA試劑盒酶法樣本收集

1.血清樣本用干燥管（紅色）或者促凝管（黃色）收集

2.血漿用抗凝管，一般有EDTA抗凝（紫色）、枸櫞酸鈉抗凝（黑色或者藍色）

3.動物組織勻漿（細胞）：

              1g組織加入9ml PBS（濃度為0.1M，pH為7.4的）測分泌型指標

              1g組織加入1ml組織裂解液加入8ml PBS 測細胞內

糞便樣本：1g樣本+9ml PBS（濃度為0.01M，pH為7.4的）

沒有PBS的話也可以用一下生理鹽水，還是用PBS

樣本離心轉速及時間

1.試管采集的樣本：3000轉，離心五分鐘取上清

2.離心管或者EP管采集的樣本：5000--8000轉3分鐘取上清

3..樣本保存--如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

人糖抗原72-4(CA72-4)ELISA試劑盒酶法操作步驟：

1.使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。

2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。

3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

4.甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6.甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

7.每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育15分鐘。避免光照。

8.取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

9.在450nm波長處測定各孔的OD值。

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