分子克隆的常用工具酶

【資料簡(jiǎn)介】

限制和修飾現(xiàn)象在上個(gè)世紀(jì)中期被人們所發(fā)現(xiàn)，到 2005年1月，已經(jīng)發(fā)現(xiàn) 4342 種限制酶和甲基化酶，其中限制酶有 3681 種。限制性?xún)?nèi)切酶有特定的識(shí)別位點(diǎn)和切割位點(diǎn)，切割后可產(chǎn)生平末端或粘性末端。酶切有標(biāo)準(zhǔn)的反應(yīng)體系，受末端長(zhǎng)度的影響，有位點(diǎn)偏愛(ài)性，在非標(biāo)準(zhǔn)條件下會(huì)產(chǎn)生星星活性。通過(guò)酶切連接可以增減酶切位點(diǎn)，酶切位點(diǎn)在基因組中的分布是不均勻的。大腸桿菌有三種甲基化酶和三種依賴(lài)于甲基化的限制系統(tǒng)。甲基化對(duì)限制酶切影響。基因操作常用的 DNA 聚合酶有大腸桿菌 DNA 聚合酶Ⅰ，T4、T7 DNA 聚合酶以及末端轉(zhuǎn)移酶。為滿足工作需要，還開(kāi)發(fā)有 Klenow DNA 聚合酶，耐熱 DNA 聚合酶以及反轉(zhuǎn)錄酶。除限制修飾酶和聚合酶以外，基因操作中還用到很多重要的酶，包括：連接酶、T4 多核苷酸激酶、堿性磷酸酶、核酸酶、瓊脂糖酶、蛋白酶、以及一些 DNA 結(jié)合蛋白。

分子克隆的常用工具酶

分子克隆的常用工具酶
分子克隆的常用工具酶

一、限制性核酸內(nèi)切酶

限制性核酸內(nèi)切:能在特異位點(diǎn)（酶切位點(diǎn)）上催化雙鏈DNA分子的斷裂,產(chǎn)生相應(yīng)的限制性dna片段。 
存在于細(xì)菌體內(nèi)。 
切割不同來(lái)源的DNA分子將產(chǎn)生特征性限制性酶切圖譜，具有重大應(yīng)用價(jià)值（“分子”）。