大鼠Ⅰ型前膠原羧酶聯(lián)免疫分析使用說明書

【資料簡介】

大鼠Ⅰ型前膠原羧基末端前肽（PICP）酶聯(lián)免疫分析
試劑盒使用說明書
使用目的：
本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中Ⅰ型前膠原羧基末端前肽（PICP）
含量。
大鼠Ⅰ型前膠原羧基末端前肽（PICP）酶聯(lián)免疫分析實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠Ⅰ型前膠原羧基末端前肽（ PICP）水平。
用純化的大鼠Ⅰ型前膠原羧基末端前肽（ PICP）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被
單抗的微孔中依次加入Ⅰ型前膠原羧基末端前肽（PICP），再與  HRP  標記的Ⅰ型前膠原羧
基末端前肽（PICP）抗體結合，形成抗體 -抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物
TMB 顯色。TMB 在 HRP  酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏
色的深淺和樣品中的Ⅰ型前膠原羧基末端前肽（PICP）呈正相關。用酶標儀在 450nm  波長
下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中大鼠Ⅰ型前膠原羧基末端前肽（PICP）
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因   NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。
溫育：操作同 3。
洗滌：操作同 5。
顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15分鐘.
10.終止：每孔加終止液    50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應在加終止以標準物的濃度為橫坐標， OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的

OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與  OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，
即為樣品的實際濃度。
大鼠Ⅰ型前膠原羧基末端前肽（PICP）酶聯(lián)免疫分析注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未
用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在 5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，*使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本  OD值
大于標準品孔*孔的 OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月