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胰島素放免試劑盒操作說明書

2010年04月20日 21:50:22人氣:1516來源:上海酶聯生物研究所

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【資料簡介】
胰島素放免試劑盒操作說明書
                                                                                                 INSHY-055 RIA  KIT
 
胰島素(Insulin INS)是胰島B細胞合成和分泌的一種多肽激素,分子量約 6000,它由α、
β兩條肽鏈組成。它的主要功能增加細胞膜對葡萄糖、氨基酸及鉀離子的通透性,促進這些物質
進入細胞內;促進糖原合成酶由非活化型轉化為活化型,促進糖的利用,抑制脂肪分解,促進脂類
合成;促進RNA、DNA及蛋白質的合成,進而促進細胞的構成、能量的貯備和細胞功能調節等。測
定人血清或血漿胰島素含量主要用于對糖尿病的研究,確定糖尿病的類型,胰島素β細胞的分泌功能,胰島素瘤的診斷,對探討冠心病機理,研究某些藥物對糖代謝影響及各種內分泌紊亂疾病等都有一定的意義和價值。
 
     樣品采集:用*靜脈采血,待血液凝固后分離血清。血清-20℃冰凍保存,可使用
                兩個月。溶血樣品,枸椽酸抗凝樣品不能應用。
 
 藥盒組成
  1、125I- INS 1 瓶。
  2、INS抗體1瓶。
  3、INS標準品7瓶,濃度為5、10、20、40、80、160 цIU/ml。
  4、緩沖液 1瓶       
  5、免疫分離劑(第二抗體) 1瓶。
  6、質控血清2瓶。    
 
  操作方法:
                         INS  RIA  KIT操作程序(單位:ul)
         ————————————————————————————
               試   劑      T      NSB      S0       S1~S6     樣 品
             ————————————————————————————
               零 標 準    ——    200      100       ——      ——             
               標 準 品    ——    ——    ——       100       ——
               標      品    ——    ——     ——       ——       100
               抗      體    ——    ——     100       100       100
            ————————————————————————————   
                         充分混勻,37℃ 溫育0.5小時
            ————————————————————————————   
 
                      125I- 胰島素    100   100       100       100       100
              ————————————————————————————   
                         充分混勻,37℃ 溫育2小時
              ————————————————————————————             
               分 離 劑    ——   1000     1000       1000     1000
              ————————————————————————————
         混勻,室溫15分鐘,3500 轉/分 離心15分鐘,去上清,測定沉淀cpm-值。
 
  結果計算:
     以N/T、B/T計算NSB、S0結合百分率,以B/B0計算標準及待測物結合百分率,
  在半對數座標紙上繪制標準曲線,查出樣品值或由自動Υ-計數儀器直接讀出結果。
  注意事項:
       1、本月標準品每瓶用         ml緩沖液稀釋;
          本月藥盒抗體每瓶用       ml緩沖液稀釋;
          本月藥盒標記每瓶用       ml緩沖液稀釋;
       2、收到測定盒后,請放2-8℃冰箱中保存。
          * 3、分離劑在使用前充分混勻(不可冰凍),標記、抗體、溶解后,直接應用,冰凍
保存。標準品溶解后,0.1ml分裝,-20℃可放一月,避免反復凍融。
  本試劑盒主要技術參數:
      標準范圍:5-160u IU/ml
      靈敏度: 2 u IU/ml 。
      精密度:批內:CV<10%;批間CV為<15% 。
  正常參考值
各實驗室應建立自己的正常值,下列正常參考值僅供參考:          單位:μ IU/mL.

 
 
 
 
30分鐘
 
60分鐘
 
120分鐘
 
180分鐘
 
正常(N=216)
(100克饅頭餐)
 
 
14.0±8.70
 
 
 
75.8±43.8
 
58.2±38.1
 
22.4±20.6
 
正常(N=87)
(75克葡萄糖)
 
 
12.7±7.10
 
76.7±44.4
 
76.6±33.8
 
46.9±26.7
 
14.9±9.90
 
II型糖尿病例(N=63)
(100克饅頭餐)
 
 
18.8±7.40
 
 
 
48.4±29.3
 
50.4±27.4
 
32.5±14.50

   本月藥盒參考數據:  
        ———————————————————————————————————————
                T     NSB     S0           S1      S2      S3      S4      S5      S6
        ———————————————————————————————————————
        CPM
        ———————————————————————————————————————
                N/T%       B0/T%       B/ B0 %
        ———————————————————————————————————————   

上海酶聯生物研究所作者

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