免費代測人基質金屬蛋白酶7ELISA檢測試劑盒

【資料簡介】

本試劑僅供研究使用  標本：血清或血漿

 

試驗原理：

MMP-7試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.人基質金屬蛋白酶7ELISA檢測試劑盒已知MMP-7濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將MMP-7和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中MMP-7的濃度呈比例關系。

自備材料

蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

 

安全性

避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

 

操作注意事項

試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。人基質金屬蛋白酶7ELISA檢測試劑盒使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

 

樣品收集、處理及保存方法

血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

試劑的準備

標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。

洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

 

操作步驟

使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

 

局限

6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。

 

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。

2. 特異性：不與其它細胞因子反應。

3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。

 

結 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

 

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的MMP-7標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的MMP-7含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

 

3、檢測值范圍：0-400ng/ml

 

4、敏感度： 1.0 ng/ml

青藤堿 含量測定 110774-200206 M100725 20mg
胡椒堿 含量測定 110775-200203 M100726 20mg
香草酸 含量測定 110776-200402 M100727 50mg
柴胡皂苷 a 含量測定 110777-200507 M100728 20mg
柴胡皂苷 d 含量測定 110778-200506 M100729 20mg
氧化苦參堿 含量測定 110780-200405 M100730 20mg
黃芪甲苷 含量測定 110781-200613 M100731 20mg
斷血流皂苷 A（醉魚草皂苷 Ⅳb） TLC掃描法     含量測定 110782-200301 M100732 20mg
■斑蟊素 含量測定 110783-200604 M100733 20mg
槐定堿 鑒別 110784-200303 M100734 20mg
獐牙菜苦苷 鑒別 110785-200203 M100735 20mg
肉桂酸 含量測定 110786-200503 M100736 100mg
蘆薈苷 含量測定 110787-200905 M100737 20mg
桉油精 含量測定 110788-201004 M100738 0.1ml
檀香油 鑒別 110789-200005 M100739 0.1ml
4-甲氧基水楊醛 含量測定 110790-200202 M100740 20mg
對二甲氨基苯甲醛 內標無含測 110791-9102 M100741 100mg
對羥基苯甲酸丁酯 含量測定 110792-200503 M100742 100mg
防己諾林堿（漢防己乙素 含量測定 110793-200605 M100743 20mg
土大黃苷 鑒別 110794-200504人基質金屬蛋白酶7ELISA檢測試劑盒 M100744 20mg
蘆薈大黃素 含量測定 110795-201007 M100745 20mg
大黃酚 含量測定 110796-200716 M100746 20mg
穿心蓮內酯 含量測定 110797-200307 M100747 20mg
吳茱萸內酯 含量測定 110800-200404 M100748 20mg
吳茱萸次堿 含量測定 110801-201006 M100749 20mg