關于酶點（ELISPOT）技術的相關知識

【資料簡介】

     酶點（ELISPOT）技術是zui近幾年發展起來應用于抗病毒免疫和抗腫瘤免疫的一種新型測定方法。
     Sanquin 提供的顆粒酶-B酶點檢測試劑盒應用技術，靈敏度高，僅一個陽性細胞即可測到存在的顆粒酶-B。特異性強，結果重復性好。為抗病毒和抗腫瘤研究提供新型強有力的檢測工具。
酶點技術與酶標技術比較
1、酶點技術明顯的特點是靈敏度增加
2、酶點技術僅需要1 個陽性細胞 / 孔即可,靈敏度達到1 :1,000,000的陽性準確分析
3、酶標技術需要至少要有400 細胞 / 孔才可達到有意義的檢測水平
4、能在單細胞水平上分析產生細胞因子的T細胞
顆粒酶-B介紹
       顆粒酶是外切*蛋白酶，來自細胞毒T淋巴細胞（CTLs）和自然殺傷細胞（NK）釋放的細胞漿顆粒。這些顆粒含有顆粒酶原及其它蛋白酶原，包括穿孔蛋白。由于CTL細胞與靶細胞結合（經CTL受體和靶細胞表面的抗原肽-MHCⅠ類分子復合物結合），通過顆粒的胞吐過程，顆粒酶進入了靶細胞，穿孔蛋白在細胞膜聚合而進入靶細胞形成跨膜的小孔，使靶細胞膜穿孔。穿孔蛋白通過使粒酶-內體膜穿孔釋放出粒酶。顆粒酶B激活了細胞內caspases反應, zui后引起靶細胞的死亡.  顆粒酶A也能誘發靶細胞的凋亡。
       在許多疾病中，用流式細胞術和免疫細胞可測定顆粒酶B陽性的CTL百分比。 部分顆粒酶也可 “漏”入外周血液和其它體液。 在健康者體內也可測得顆粒酶。.這些可溶性的顆粒酶可以用ELISA測定。
       PeliSPOT人顆粒酶 B 試劑盒用于重復性 特異性定量測定人CTL細胞和NK細胞分泌釋放的顆粒酶B頻數。