相色譜法測定蔬菜中3種有機磷農藥殘留

【資料簡介】

    有機磷農藥是目前我國使用量較大的殺蟲劑之一，主要應用于糧食、蔬菜和水果上。雖然有機磷農藥屬非持久性農藥，但其大量使用必然會對環(huán)境產生負面影響，對人、蓄構成嚴重威脅．長期食用受污染的糧食、蔬菜，是導致癌癥、動脈硬化、心血管病、胎兒畸形、死胎、早天、早衰等疾病的重要原因；絕大多數(shù)人食用有害蔬菜后并不馬上表現(xiàn)出癥狀，但毒物在人體中富集，時間長了便會釀成嚴重后果。我國近年來發(fā)生的農藥中毒事故大多數(shù)集中于高毒有機磷農藥，以對硫磷zui多，部分地區(qū)占80％左右。因此，建立有效的檢測農副產品中有機磷農藥殘留量的方法具有重要意義。有機磷農藥的測定常采用氣相色譜法，可是，大部分有機磷農藥具有很強的極性和熱不穩(wěn)定性，給氣相色譜分析帶來一定的難度。本研究采用液相色譜法同時測定蔬菜中甲基對硫磷、乙基對硫磷和甲拌磷。

1 實驗部分

1．1 儀器與試劑

      儀器．LC-1OAT液相色譜儀（日本島津公司），包括：SPD-10AVP／10APVP紫外-可見檢測器，LC-1OA高壓溶液輸送泵和N2000色譜工作站（浙江大學智能信息工程研究所）；BF2000氮氣吹干儀（北京八方世紀科技有限公司）；FS-1電動勻漿機（金壇市富華儀器有限公司）．試劑．甲基對硫磷標準品（99.0％，國家農藥質檢中心（沈陽））；乙基對硫磷標準品（99.0％，天津農藥質檢中心）；甲拌磷標準品（98.0％，天津農藥質檢中心）；甲醇（色譜純，北京化工廠）；乙腈（色譜純，天津市博迪化工有限公司）；實驗用水為重蒸餾水。

1．2 色譜條件

       色譜柱為Shim-Pack：VP-ODS（150L×4．6）；流動相為V甲醇：V水=85：15；流速為1.0mL／min．進樣量20μL，以基線構成之面積稱峰面積。A＝×σ×h＝2.507σh＝1.064 Wh/2h>峰面積外標法定量。

1．3 標準溶液的配制

      準確稱取一定量的農藥標準品，用甲醇制成一定濃度的儲備液，再逐級稀釋儲備液，得質量濃度分別為0.10、0.50、1.0、1.5、2.0mg／L的標準混合液。

1．4 樣品處理方法

      取1000g的白菜，取可食部分，用干凈的紗布擦去樣品表面的附著物，采用對角線分割法，取對角部分，將其切碎．準確稱取3份25g試樣，分別加入50.0mL的乙腈，在勻漿機中勻漿2min后用濾紙過濾，濾液收集到裝有5g氯化鈉的100mL的具塞量筒中，蓋上塞子，劇烈震蕩1min，靜至10min，使乙腈與水相分層．將含乙腈的有機層經盛有3g的*的漏斗過濾于100mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，從中吸取10mL溶液，再用氮氣吹干儀吹至近干后用甲醇溶解定容至5mL，經0.45μm濾膜過濾后進樣。

2 結果與討論

2．1 測定波長的選擇

      分別將3種農藥的標準儲備液依次用UV一1100紫外／可見分光光度計進行波長掃描，測得3種農藥的zui大吸收波長分別為甲基對硫磷265nm，乙基對硫磷259nm，甲拌磷為238nm．綜合考慮3種組分的zui大吸收值及靈敏度，zui終選擇紫外檢測波長為250nm。

2．2 流動相組成對分離度的影響

      實驗考察了甲醇-水的不同比例對甲基對硫磷、乙基對硫磷、甲拌磷分離的影響。實驗結果表明，隨著甲醇含量的增加，其分離度逐漸減小，當甲醇：水=85：15時，各組分仍能夠得到很好的分離，且分析所用的時間較短。

2．3 工作曲線和檢出限

      取“1．3”節(jié)的標準溶液，在優(yōu)化的色譜條件下進行分析，得到標準色譜圖。同一樣品平行測定5次，取其平均值，繪制工作曲線，以峰面積A對濃度c（mg／L）回歸計算，結果表明線性關系良好，回歸方程、相關系數(shù)和檢測限。

2．4 精密度實驗

      取質量濃度為1.5mg／L的混合標準品，在上述色譜條件下，連續(xù)進行7次測定，經計算得到測定甲基對硫磷、乙基對硫磷、甲拌磷的精密度RSD分別為4.6％、3.2％、2.9％。

2．5 回收率測定

      在已知含量的白菜樣品中分別加入不同濃度的有機磷農藥標準品，按“1．4”節(jié)方法制備樣品液進行測定，扣除樣品中原有的農藥含量，求出加標回收率，結果可知，甲基對硫磷回收率為95.44％～98.33％；乙基對硫磷回收率為93.33％～101.67％；甲拌磷回收率為94.00％～97.78％。

2．6 樣品分析

      在白菜中加入上述3種農藥作為模擬蔬菜樣品，按“1．4”節(jié)方法處理樣品后按上述色譜條件進行測定。得到樣品色譜圖如圖所示。甲基對硫磷、乙基對硫磷、甲拌磷的殘留量分別為1.75、2.13、1.83mg/kg。

參考文獻：
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[2] Henry K Rotich，張卓勇，趙進英，等．環(huán)境水中甲基對硫磷、對硫磷和辛硫磷農藥殘留的SPE-HPLC分析[J]．分析測試報，2002，21（5）：50—52．